研究目的
利用傅里叶变换红外成像光谱技术和透射电镜技术,研究大鼠光血栓性缺血性中风后九周半影区(PIZ)和同侧白质(WM)的生化和分子变化。
研究成果
傅里叶变换红外成像生物光谱技术在亚细胞水平上提供了常规方法难以获取的新型生化信息。研究结果表明,基于抗氧化剂治疗的治疗策略可通过清除脂质过氧化产物来减轻和预防神经毒性,从而缓解慢性缺血期的组织损伤。
研究不足
该研究仅限于特定时间点(中风后九周)和特定模型(大鼠光血栓性中风)。尽管傅里叶变换红外光谱(FTIR)和透射电子显微镜(TEM)的空间分辨率很高,但可能无法捕捉到所有亚细胞变化。
1:实验设计与方法选择:
采用傅里叶变换红外成像光谱技术和透射电子显微镜技术对脑组织样本进行研究。制备相邻切片的苏木精-伊红染色图像用于对比观察中风后形态学变化。
2:样本选择与数据来源:
选取六只雄性斯普拉格-道利大鼠进行光血栓性中风造模,于中风九周后采集脑组织样本。
3:实验设备与材料清单:
FTIR Cary 620显微光谱仪、FEI TF20透射电镜、徕卡RM 2155半自动轮转式切片机、氟化钡窗口片。
4:实验流程与操作步骤:
将脑切片固定于氟化钡窗口片,经脱蜡、脱水、干燥处理后记录红外光谱;透射电镜样本依次经过固定、脱水及染色处理。
5:数据分析方法:
使用Resolution Pro软件、Cytospec、MATLAB和OriginPro分析红外光谱数据,采用Origin Lab软件进行统计分析。
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FTIR Cary 620 micro-spectrometer
Cary 620
Agilent
Recording FTIR spectra within the spectral range of 4000–700 cm?1 with high spatial resolution.
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FEI TF20 TEM
TF20
FEI
Examining brain sections at an acceleration voltage of 100 kV.
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Leica RM 2155 semi-automated rotary microtome
RM 2155
Leica Microsystems
Cutting paraffin embedded tissue blocks into 10 μm slices.
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BaF2 window
Korth Kristalle GmbH
Mounting brain sections for FTIR analysis.
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