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利用荧光标记焦点法同步检测全细胞中p53:Mdm2与p53:Mdm4蛋白相互作用

DOI：10.1038/s41598-019-54123-z 期刊：Scientific Reports 出版年份：2019 更新时间：2025-09-11 14:15:04
摘要： 本报告描述了一种荧光蛋白-蛋白相互作用可视化技术（FLUOPPI）的开发，该技术可同步检测Mdm2:p53与Mdm4:p53两种相互作用，从而评估p53肽螺旋模拟分子对这两种蛋白相互作用的相对抑制效率。Mdm2和Mdm4的过表达常通过抑制非突变型p53的转录活性、增强其被蛋白酶体降解或阻止其核内转运，导致人类癌症中p53失活?？⒛芷苹灯渲幸恢只蛄街值鞍紫嗷プ饔玫囊种萍粒殉晌拱┮┪镅蟹⒌闹氐懔煊?。通过双模态FLUOPPI系统，我们表征了针对Mdm2单特异性或同时靶向Mdm2/Mdm4双特异性的化合物，并证明该检测方法能通过精确评估及测量细胞群的标准化处理，可靠区分对这些蛋白复合物的特异性与非特异性破坏。该方法有望提高筛选效率——既能从密切相关的相互作用家族中筛选针对单一PPI的特异性化合物，也能筛选作用于多个相关PPI对的广谱化合物，具体取决于实际需求偏好。
作者： Y. frosi，K. inoue，Siti Radhiah Ramlan，D. p. Lane，t. Watanabe，c. J. Brown
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研究概述 实验方案 设备清单

研究目的

开发一种荧光蛋白相互作用可视化（FLUOPPI）系统，用于同步测量Mdm2:p53和Mdm4:p53两种相互作用，以评估p53肽螺旋模拟分子对这两种蛋白相互作用的相对抑制效率。

研究成果

FLUOPPI检测法能分别精确测定Mdm2特异性及双特异性小分子抑制剂对p53:Mdm2和p53:Mdm4相互作用的影响，还可评估一类新兴的"订书肽"化合物（旨在同时抑制Mdm2和Mdm4）的代表药物。

研究不足

该研究承认药物治疗可能对两种细胞群产生差异化效应，而双峰FLUOPPI系统可能无法捕捉这些细胞效应。

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