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用于活细胞中Hg2+检测和细胞内成像的基因编码FRET光学传感器

DOI:10.1007/s10295-019-02235-w 期刊:Journal of Industrial Microbiology & Biotechnology 出版年份:2019 更新时间:2025-09-11 14:15:04
摘要: 由于汞具有潜在毒性,亟需了解其在活细胞内的摄取、转运及通量变化。传统汞离子(Hg2?)分析技术存在侵入性强、成本高且灵敏度低等缺陷。本研究开发了一种高效基因编码汞FRET传感器(MerFS),可实时检测痕量Hg2?的细胞动态。该传感器通过将周质汞结合蛋白MerP夹在增强型青色荧光蛋白(ECFP)与黄色荧光蛋白(Venus)之间构建而成。MerFS具有pH稳定性,能产生可测量的荧光信号,并对Hg2?表现出高灵敏度与选择性结合。突变体MerFS-51的表观亲和力(Kd)为5.09×10?? M,使Hg2?定量检测范围达到0.210-1.196 μM。将该传感器靶向导入大肠杆菌、酵母和人胚胎肾(HEK)-293T细胞后,可通过高响应度饱和曲线实现细胞内Hg2?浓度的动态测量,证实其在细胞体系中的应用潜力。
作者: Neha Soleja,Mohamad Aman Jairajpuri,Aarfa Queen,Mohd. Mohsin
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研究概述 实验方案 设备清单

开发一种高效的基因编码汞FRET传感器(MerFS),用于实时测量细胞内痕量Hg2+的动态变化。

开发的基于FRET的基因编码纳米传感器MerFS-51是一种高效的非侵入式活细胞Hg2+离子监测工具,具有高灵敏度和选择性。该传感器在理解Hg2+稳态及金属诱导疾病诊断方面具有潜在应用价值。

该研究聚焦于汞离子(Hg2+)的检测,未详细探讨其他重金属的检测或汞离子转化为甲基汞等其他形态的过程。

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