研究目的
开发一种快速、可重复且超灵敏的ELISA激光平台，用于蛋白质定量检测，具有小样本/试剂体积、大动态范围和高灵敏度的特点。
研究成果
开发的ELISA激光平台实现了高灵敏度（IL-6的检测限约0.1 pg/mL）、大动态范围（约4个数量级）和短检测时间（<1.5小时），且样本用量?。靠?5 μL）。该平台的重现性和可靠性较先前原型机显著提升，有望成为实际生化分析的有力工具。
研究不足
该研究承认需要改进ELISA激光技术以实现更广泛的临床应用，包括与微流控技术集成以实现样本/试剂的自动输送和激光测量。
1：实验设计与方法选择：
本研究采用基于法布里-珀罗光流控激光技术的片上ELISA激光平台。该平台包含微加工于介质镜上的SU-8反应微孔，具有高重复性与灵敏度。
2：样本选择与数据来源：
实验使用HRP标记的IgG抗体溶液及人IL-6蛋白。
3：实验设备与材料清单：
包括介质镜、微加工用SU-8光刻胶、用于光学限域的聚苯乙烯微球以及QuantaRed荧光ELISA底物。
4：实验流程与操作步骤：
包含反应微孔的微加工、提升蛋白亲和力的表面硅烷化处理、激光发射检测的光学系统搭建以及蛋白质定量的ELISA检测流程。
5：数据分析方法：
通过测量激光起辉时间并转换为反应速率，实现蛋白质浓度定量。
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Polystyrene microbeads
84135-5ML-F
Sigma-Aldrich
Used for lateral optical confinement in ELISA laser reactors.
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3-APTES ((3-Aminopropyl)triethoxysilane)
440140-100ML
Sigma-Aldrich
Used for surface silanization to enhance protein affinity.
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Goat anti-mouse IgG (H+L) Superclonal? antibody with HRP conjugation
A28177
Thermo Fisher Scientific
Used in IgG-HRP immobilization experiments.
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Streptavidin poly-HRP
21140
Thermo Fisher Scientific
Used to maximize ELISA signal.
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QuantaRed Enhanced Chemifluorescent HRP Substrate Kit
Thermo Fisher Scientific
Used as the fluorescent substrate in ELISA laser experiments.
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Human IL-6 DuoSet ELISA Kit
DY206
R&D Systems
Used for IL-6 ELISA laser experiments.
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Heat deactivated human serum
H3667
MilliporeSigma
Used as analyte solvent in IL-6 ELISA laser experiments.
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Dielectric mirrors
Evaporated Coatings Inc.
Used to form Fabry–Pérot cavities for optical feedback in ELISA laser experiments.
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Pulsed optical parametric oscillator (OPO) laser
Used as the excitation source in the optical setup.
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Spectrometer
Horiba iHR550
Horiba
Used for analyzing emission light from the FP cavity.
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