研究目的
开发一种高灵敏度电化学生物传感器,用于监测人血清样本中蛋白酶抑制剂类抗逆转录病毒药物茚地那韦(IDV)的治疗药物监测(TDM),以防止其首过代谢的不良反应并优化给药方案。
研究成果
CYP3A4|TGA-PdTeQD|Cyst|Au生物传感器展现出高灵敏度,适用于检测极低浓度的IDV,使其能够用于患者(尤其是超快速代谢者)的治疗药物监测。该生物传感器在人血清样本中的表现表明其具有临床诊断应用的潜力。
研究不足
该生物传感器的储存稳定性和重现性需要优化,因为其在冰箱中的储存时间越长响应值越低,表明酶可能发生了变性。
1:实验设计与方法选择:
研究通过硫醇和碳二亚胺共价键合化学,在半胱胺功能化的金圆盘电极上沉积CYP3A4和TGA-PdTeQD薄膜制备电化学生物传感器。采用循环伏安法测定该生物传感器的电化学特征信号。
2:样本选择与数据来源:
使用掺入IDV的人血清样本测试生物传感器在实际样本中的适用性。
3:实验设备与材料清单:
设备包括EG&G普林斯顿应用研究公司273A恒电位仪/恒电流仪、尼高力Evolution 100紫外-可见分光光度计、堀场NanoLog? 3-22-TRIAX、珀金埃尔默100型傅里叶变换红外光谱仪及堀场XploRA?台式共聚焦拉曼显微镜。材料包含氯化钯、硫代乙醇酸、氢氧化钠、硼氢化钠、盐酸、EDC、NHS、一水合磷酸二氢钠、二水合磷酸氢二钠、半胱胺、人血清及人细胞色素P450-3A4酶。
4:实验流程与操作步骤:
生物传感器制备过程为:金圆盘电极半胱胺功能化→EDC/NHS活化→TGA-PdTeQD沉积→CYP3A4酶固定化。通过循环伏安法表征生物传感器并校准其对IDV的响应。
5:数据分析方法:
根据特征还原峰电位值-0.26V处的循环伏安响应,测定生物传感器的灵敏度、线性范围及检测限。
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