研究目的
评估低强度激光疗法(LLLT)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、迁移及管腔形成的影响及其相关机制。
研究成果
低水平激光治疗(LLLT)有助于增强人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的增殖、迁移和管腔形成。PI3K/Akt信号通路的激活对促进LLLT诱导的细胞增殖、迁移和血管生成至关重要,因为PI3K抑制剂能有效降低LLLT暴露所诱导的效应。
研究不足
该研究主要集中于体外细胞实验。若能在体内实验和临床试验中获得相同结果,其可信度将更高。需要深入探究eNOS、VEGFA和HIF-1α分子在低强度激光治疗(LLLT)促进血管生成中的作用机制。
1:实验设计与方法选择:
将人脐静脉内皮细胞(HUVECs)置于不同激光参数下进行照射以筛选最佳参数,检测低强度激光治疗(LLLT)对HUVECs增殖、迁移及管腔形成的影响,同时测定血管生成相关基因水平及PI3K/Akt信号通路变化。
2:样本选择与数据来源:
HUVECs由上海复恒生物科技有限公司提供,经短串联重复序列(STR)基因分型检测合格。
3:实验设备与材料清单:
采用便携式GaAlAs半导体激光器进行照射,PI3K信号通路抑制剂(LY294002)购自Abcam公司。
4:实验流程与操作步骤:
培养HUVECs并施加不同参数的LLLT处理,检测细胞活力、增殖、迁移及管腔形成能力,通过蛋白质印迹法分析PI3K/Akt信号通路。
5:数据分析方法:
采用SPSS 21.0统计软件处理数据,组间比较使用单因素方差分析(ANOVA)或重复测量方差分析。
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获取完整内容-
GaAlAs laser
Xi’an Huanke Optoelectronics Corp.
Generating a laser beam with a wavelength of 650 nm for laser irradiation.
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PI3K signaling pathway inhibitor
LY294002
Abcam Inc.
Inhibiting the PI3K/Akt signaling pathway to verify its involvement in the effects of LLLT on HUVECs.
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Dulbecco's Modified Eagle Medium
DMEM
Culture medium for HUVECs.
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Cell Counting Kit-8
CCK-8
Assessing cell viability.
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Microplate reader
Thermo Fisher Scientific Inc.
Measuring the optical density (OD) value for each well in the CCK-8 assay.
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EdU assay kit
Identifying cell proliferation.
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Matrigel
Pre-coating for tube formation assay.
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Western blot assay reagents
Assessing phosphorylation levels of PI3K, Akt, and mTOR proteins.
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ELISA kit
Multi Sciences (Lianke) Biotech Co., Ltd.
Detecting the secretion of VEGFA.
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