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利用液相常压基质辅助激光解吸/电离质谱法通过脂质谱分析进行细菌鉴定

DOI:10.1515/cclm-2019-0908 期刊:Clinical Chemistry and Laboratory Medicine (CCLM) 出版年份:2019 更新时间:2025-09-16 10:30:52
摘要: 背景:近年来,质谱技术(MS)被应用于临床微生物分型,利用基质辅助激光解吸电离(MALDI)快速记录微生物特异性质谱图谱的优势。最新研究表明,液相常压(AP)MALDI技术能从均质样本中产生极其稳定的离子流,并为较大生物分子生成类似电喷雾电离(ESI)的多电荷离子,同时保留了传统MALDI技术的诸多优势——包括高污染物耐受性、低样本消耗量和快速分析能力。本研究通过探索液相AP-MALDI MS的这些及其他优势,评估其在微生物分型中的应用潜力。 方法:采用液相AP-MALDI MS分析了遗传多样性细菌菌株,包括大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和肺炎克雷伯菌等临床相关菌种。细菌培养物经乙醇与甲酸的简易快速提取流程处理后,使用液态支撑基质(LSM)点样,并通过搭载自主搭建AP-MALDI离子源的Synapt G2-Si质谱仪进行分析。 结果:各菌种在400-1100 m/z范围内呈现独特的脂质图谱,可实现菌种鉴别。传统(固体)MALDI MS产生的谱图中包含大量基质相关簇峰且缺乏脂质峰。通过主成分分析(PCA)发现,测试菌种的质谱图形成明显聚类,基于PCA构建的预测模型分类准确率达98.63%。 结论:基于其独特脂质图谱,液相AP-MALDI MS图谱足以区分临床相关病原菌与其他细菌。
作者: Sophie E. Lellman,Rainer Cramer
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研究概述 实验方案 设备清单

基于独特脂质谱研究液体AP-MALDI质谱在微生物生物分型中的潜力。

基于独特的脂质谱特征,液体AP-MALDI质谱图谱能够区分具有临床意义的细菌病原体,为细菌鉴定提供了一种快速的替代分析方法。

该研究的主要局限在于对复杂生物样本中大于30 kDa的大肽和蛋白质进行常规分析。环境因素会影响细菌的脂质组成,这需要进一步研究。

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