1：实验设计与方法选择：

本研究采用色相-饱和度-亮度（HSB）色彩空间模型简化图像细胞术中的表面创建流程，通过将多通道荧光图像转换为HSB通道进行表面构建。

2：样本选择与数据来源：

研究使用小鼠耳部针刺损伤模型的静态与动态成像数据集，包括免疫染色的全层耳部皮肤及多种荧光标记组合的脾细胞。

3：实验设备与材料清单：

设备包含Olympus倒置FV1000共聚焦显微镜和LaVision TriM Scope II显微镜；材料包括用于染色的各类荧光标记物与抗体。

4：实验流程与操作步骤：

工作流程涵盖图像采集、HSB通道转换、Imaris软件表面创建及FlowJo统计分析。

5：数据分析方法：

包括光谱补偿、Imaris中的统计提取与表面可视化，通过组织细胞术定义细胞亚群。