研究目的
利用双光子聚合技术打印具有不同特征尺寸的拓扑图案,研究几何形貌对细胞分化的影响。
研究成果
该研究表明,利用双光子聚合技术研究并控制干细胞命运与基底相互作用的函数关系具有潜力。微小结构特征会促使干细胞向表皮层分化,而较大结构特征则会抑制其自我更新。
研究不足
随着特征宽度减小,相对恒定的特征高度对应着近似宽高比(W:H)为1:1、1:2和1:3的情况。由于宽高比与特征间距随特征宽度同步变化,所观察到的现象不能归因于任何一个明确的几何变量。
1:实验设计与方法选择:
采用双光子聚合技术打印具有不同特征尺寸的拓扑图案,以研究其对细胞分化的影响。
2:样本选择与数据来源:
使用人诱导多能干细胞,将其附着于基底或非图案化对照样本上培养1周。
3:实验设备与材料清单:
Photonic Professional GT系统(德国Nanoscribe GmbH公司)、IP-L-780光刻胶、玻璃盖玻片、聚-D-赖氨酸、层粘连蛋白。
4:实验步骤与操作流程:
细胞在阵列上孵育7天,通过基因表达的定量评估分析分化情况。
5:数据分析方法:
使用TaqMan hPSC Scorecard检测和实时定量PCR分析基因表达数据。
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获取完整内容-
Photonic Professional GT System
Nanoscribe GmbH
Used to create high-resolution topographical features.
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IP-L-780
Nanoscribe GmbH
High-resolution, commercially available photoresist used in the study.
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glass coverslips
CS-30R
Warner Instrument
Used as fabrication substrates.
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poly-d-lysine
Charge enhancer, facilitating adsorption of laminin to glass surfaces.
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laminin
Used for coating surfaces to facilitate cell adhesion.
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