研究目的
开发一种光化学方法,在惰性基底上以亚微米长度尺度独立图案化多种蛋白质,用于细胞粘附研究。
研究成果
所引入的光化学方法能够在亚微米长度尺度上独立地对多种蛋白质进行图案化处理,并实现精确的时空控制,为细胞信号传导研究、耦合酶反应及能量传递系统提供了潜在应用前景。
研究不足
该方法在实现亚衍射极限图案化以及在大面积范围内保持蛋白质活性方面可能面临挑战。
1:实验设计与方法选择:
采用光活化氯嘧啶配体的光化学方法,将SnapTag融合蛋白共价固定于金表面的烷基硫醇自组装单层膜上。
2:样本选择与数据来源:
金基底自组装单层膜、SnapTag融合蛋白及哺乳动物细胞系。
3:实验设备与材料清单:
紫外交联仪、共聚焦显微镜、MALDI-TOF质谱仪、表面等离子体共振光谱仪。
4:实验步骤与操作流程:
两步法流程,包括图案化紫外光照激活配体及与SnapTag融合蛋白孵育。
5:数据分析方法:
通过SAMDI-MS、MALDI-TOF及表面等离子体共振光谱确认蛋白固定化效果与活性。
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UV crosslinker unit
CL1000-L
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Biacore 2000
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