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以多种绿色荧光蛋白作为化学交联供体，用于育空橙色荧光蛋白的福斯特共振能量转移：一项基于项目的本科实验教学体验

DOI：10.1002/bmb.21158 期刊：Biochemistry and Molecular Biology Education 出版年份：2018 更新时间：2025-09-10 09:29:36
摘要： 福斯特共振能量转移（FRET）是生物医学研究中众多技术的基础。由于其在分子传感中的广泛应用，FRET常被纳入生物学、化学和物理学课程。尽管FRET在生物物理科学中具有重要意义，但构建FRET实验的复杂性和难度导致其在本科实验室环境中的应用有限。在此，我们介绍一个实用的本科实验室实验，通过使用多种绿色发射荧光蛋白（FPs）作为供体，与交联的育空橙色FP进行能量转移来教授FRET。该实验使学生能够将基础实验操作与实际应用联系起来，适用于分子生物学、生物化学、物理化学和生物物理实验室课程。
作者： Mira K. Marchioretto，Jacqueline T. Horton，Calvin A. Berstler，Joseph B. Humphries，Isaac J. Koloditch，Samuel D. Voss，Kimberly de La Harpe，Barry W. Hicks，Latisha R. Jefferies
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研究概述 实验方案 设备清单

研究目的

开发一个实用的本科实验课程，利用多种绿色发射荧光蛋白（FPs）作为供体，与交联的育空橙色荧光蛋白（Yukon orange FP）配合，用于教学FRET技术，使学生能够将基础实验操作与实际应用联系起来。

研究成果

该实验成功凸显了基于绿色荧光蛋白（GFP）的荧光共振能量转移（FRET）的重要特性，将GFP在本科实验教学中的应用拓展至新领域。它既培养了学生的基础生物化学实验技能，又通过当前涉及GFP融合FRET的研究提供了实操经验，适用于高年级本科及研究生实验课程。

研究不足

构建FRET实验的复杂性和难度限制了其在本科实验室环境中的应用。该实验需要特定设备和材料，学生可能需要更多时间来磨练技术并充分理解理论。

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