研究目的
在可见光波长范围(450-700纳米)内展示光谱显微断层扫描技术,直接测量三维样品的吸收系数和折射率光谱。
研究成果
该研究成功展示了可见光波段的光谱显微断层扫描技术,可直接测量三维样品的吸收系数和折射率光谱。该方法能区分不同类型的微珠以及处于不同氧合状态的红血球,显示出对生物过程进行无创、无标记成像与量化的潜力。
研究不足
DHT的成像分辨率约为相干衍射极限的两倍,该方法对激光散斑噪声较为敏感,尤其在吸收测量中更为明显。角度扫描断层扫描中的缺失锥区域会导致图像沿轴向畸变并低估折射率。
1:实验设计与方法选择:
采用波长扫描光源和可变光程策略的数字全息断层扫描技术(DHT)。
2:样本选择与数据来源:
三种聚苯乙烯微球(未染色、蓝色染色和红色染色)及单颗红细胞(氧合与脱氧状态)。
3:实验设备与材料清单:
超连续谱激光器(NKT Photonics,WL SC400-4)、可调谐滤光片(NKT Photonics,LLTF-VIS)、物镜(Mitutoyo,×10 M Plan APO)、聚光镜与物镜(Olympus,UPlanFl)、14位电荷耦合器件相机(Allied Vision,Pike F-421B)。
4:4)、可调谐滤光片(NKT Photonics,LLTF-VIS)、物镜(Mitutoyo,×10 M Plan APO)、聚光镜与物镜(Olympus,UPlanFl)、14位电荷耦合器件相机(Allied Vision,Pike F-421B)。 实验流程与操作步骤:
4. 实验流程与操作步骤:波长以5纳米步进从450至700纳米扫描,记录样本不同入射角度的成像。
5:数据分析方法:
将复杂散射场映射至三维空间频域中的埃瓦尔德球,通过三维逆傅里叶变换获取物体的散射势。
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supercontinuum laser
WL SC400-4
NKT Photonics
Provides single-mode laser light at a selected wavelength in the range from 400 to 1000 nm.
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tunable filter
LLTF-VIS
NKT Photonics
Filters the supercontinuum laser to select specific wavelengths.
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condenser and objective lenses
UPlanFl
Olympus
Used for imaging the sample.
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charge-coupled-device camera
Pike F-421B
Allied Vision
Records the images for analysis.
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objective lens
×10 M Plan APO
Mitutoyo
Collimates the laser beam.
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