研究目的
研究多角度干涉显微镜（MAIM）在多色活细胞超分辨率体积成像中的应用，以探究细胞迁移过程中线粒体和微管结构的亚细胞动力学。
研究成果
MAIM是一种强大的超分辨率技术，能够实现体积成像、活细胞成像、多色成像、长时间序列观测以及低光损伤的结合，适用于研究细胞膜附近动态分子行为。
研究不足
该技术的成像速度取决于相机的图像采集时间，实际应用中需考虑染料浓度、量子效率、光稳定性和系统检测效率。
1：实验设计与方法选择：
该研究结合全内反射荧光结构光照明显微技术与多角度倏逝波照明，实现超分辨率成像。
2：样本选择与数据来源：
使用固定的和活的U2OS及U373细胞，用多种荧光染料标记线粒体和微管。
3：实验设备与材料清单：
包括高数值孔径油浸物镜、EMCCD相机、用于荧光激发的激光器以及各种光学元件。
4：实验流程与操作步骤：
涉及获取多角度和多相位原始图像，重建横向超分辨率图像，并分割感兴趣的样本信息以进行三维超分辨率重建。
5：数据分析方法：
采用定制MATLAB代码进行曲线拟合、梯度下降和交替方向乘子算法，同时使用ImageJ插件进行数据预处理和后处理。
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optical breadboard
B7575L
Thorlabs
Minimize external mechanical vibrations
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laser
Sapphire 488-300 CW CDRH
Coherent
Fluorescence excitation
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laser
Sapphire 561-300 CW CDRH
Coherent
Fluorescence excitation
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laser
Genesis MX 639–1000
Coherent
Fluorescence excitation
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beam collimator
ZC618FC
Thorlabs
Collimate beams
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polarization beam splitter
CCM1-PBS251/M
Thorlabs
Separate parallel beams into two paths with orthogonal polarization directions
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Control the intensity ratio of two paths
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Thorlabs
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Shift the interference pattern phase
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beam splitter
CCM1-BS013
Thorlabs
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EMCCD camera
iXon Ultra 888
Andor
Detect the fluorescence emitted by the sample
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AOTF
AOTFnC-400.650-TN
AA Quanta Tech
Control the illumination wavelength and the intensity of the lasers
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single mode polarization maintaining fiber
Oz Optics
Couple beams into a single mode polarization maintaining fiber
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galvanometer set
CTI 8310k
Cambridge Technology
Change the incident angle and rotate the orientation of the interference pattern
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high-NA oil-immersion objective
100 × /1.49 TIRF
Nikon
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