研究目的
该研究的总体目标是确定能在成像缓冲液中无需使用光稳定剂混合物的情况下，同时提升两种技术空间与时间分辨率的染料及条件。
研究成果
该研究表明，有机荧光团的分子内光稳定化可增强其用于超分辨率显微镜的光物理特性，在无需光稳定缓冲液的情况下实现更高的空间和时间分辨率。但在STORM类成像中必须考虑光稳定剂对光开关动力学的影响。
研究不足
该研究强调了在活细胞成像中使用光稳定缓冲液的技术限制，以及由于分子内光稳定作用对光开关动力学的影响，STORM实验需要精心设计。
1：实验设计与方法选择：
本研究测试了自修复有机荧光团在超分辨显微镜（特别是STED和STORM技术）中的性能。方法包括使用共聚焦扫描显微镜、单分子STED与共聚焦显微镜以及STORM显微镜来表征染料的光物理特性。
2：样本选择与数据来源：
样本包含ATTO647N、STAR635P和Cy5染料（含与不含光稳定剂），固定于寡核苷酸上。数据通过定制的共聚焦与STED显微镜采集。
3：7N、STAR635P和Cy5染料（含与不含光稳定剂），固定于寡核苷酸上。数据通过定制的共聚焦与STED显微镜采集。 实验设备与材料清单：
3. 实验设备与材料清单：设备包括定制共聚焦显微镜、Microtime-200 STED显微镜及用于TIRF成像的倒置显微镜。材料包含ATTO647N、STAR635P、Cy5染料及其光稳定剂结合物。
4：7N、STAR635P、Cy5染料及其光稳定剂结合物。 实验流程与操作步骤：
4. 实验流程与操作步骤：研究涉及将荧光团固定在寡核苷酸上，通过共聚焦与STED显微镜评估光稳定性与分辨率，并分析STORM显微镜中的光开关动力学。
5：数据分析方法：
使用定制LabVIEW软件处理共聚焦显微镜数据，Symphotime64软件分析STED显微镜数据，自制软件处理TIRF影像以提取光物理参数。
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Microtime-200 STED microscope
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Pulsed supercontinuum source for excitation in confocal scanning microscopy
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Fluorescent dye used in super-resolution microscopy
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Fluorescent dye used in STED microscopy
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Fluorescent dye used in STORM microscopy
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