研究目的
研究金纳米颗粒的生物相容性聚合物对细胞反应的影响,特别是细胞毒性和细胞周期进程。
研究成果
金纳米颗粒(GNPs)诱导细胞周期阻滞高度依赖于其表面生物相容性。裸露金纳米颗粒上残留的有毒CTAB通常导致G0/G1期细胞周期阻滞,而用BSA包被金纳米颗粒则抑制溶酶体破裂能力、稳定微管并转向G2/M期阻滞。这将极大帮助我们通过调节纳米颗粒表面包被和生物相容性来控制细胞周期进程,并为不同生物医学应用中纳米颗粒制剂的配方制定提供指导方针。
研究不足
该研究聚焦于牛血清白蛋白(BSA)和十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)涂层对金纳米粒子(GNPs)的影响,其发现可能无法直接推广至其他生物相容性涂层或纳米粒子类型。所观察效应背后的机制有待进一步探究。
1:实验设计与方法选择:
本研究采用包裹/未包裹聚合物的金纳米颗粒(GNPs)作为模型探针,探究其细胞毒性与细胞周期进程影响。
2:样本选择与数据来源:
选用小鼠巨噬细胞RAW264.7,因其具有强纳米颗粒吞噬能力且细胞周期短。
3:7,因其具有强纳米颗粒吞噬能力且细胞周期短。 实验设备与材料清单:
3. 实验设备与材料清单:包含四氯金酸、硝酸银、CTAB、水杨酸钠、抗坏血酸、柠檬酸钠、PSSMA、BSA及用于分析的各类抗体与试剂盒。
4:实验流程与操作步骤:
包括GNPs制备与表征,随后进行流式细胞术分析细胞周期与凋亡、共聚焦显微镜分析、蛋白质印迹分析、qRT-PCR及蛋白质组学分析。
5:数据分析方法:
采用流式细胞术、共聚焦显微镜、蛋白质印迹、qRT-PCR及iTRAQ蛋白质组学技术进行蛋白质鉴定与定量。
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Confocal microscope
Leica SP8
Leica
Used for intracellular localization of GNPs and cytoskeleton morphology analysis.
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Hydrogen tetrachloroaurate
HAuCl4·3H2O
Sigma
Used in the preparation of gold nanoparticles.
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Silver nitrate
AgNO3
Sigma
Used in the preparation of gold nanoparticles.
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CTAB
Sigma
Used as a capping agent for gold nanoparticles.
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Bovine serum albumin
BSA
Sigma
Used as a coating agent for gold nanoparticles.
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Transmission electron microscope
JEOL Co.
Used to observe the morphology of nanoparticles.
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Flow cytometer
FACSCalibur BD
BD
Used for cell cycle and apoptosis analysis.
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