研究目的
研究副干酪乳杆菌KW3110对蓝光诱导的视网膜炎症和退化的预防作用。
研究成果
副干酪乳杆菌KW3110能激活M2型巨噬细胞并诱导抗炎细胞因子IL-10的产生,这可能对蓝光暴露引起的退行性视网膜疾病具有预防作用。
研究不足
该研究是在小鼠模型上进行的,其发现可能无法直接适用于人类。需要在大动物中进行进一步研究,以确认副干酪乳杆菌KW3110的预防效果。
1:实验设计与方法选择:
本研究通过体外和体内实验评估副干酪乳杆菌KW3110对M2巨噬细胞活化及IL-10产生的影响,以及其对蓝光诱导视网膜病变小鼠模型中视网膜形态和功能的?;ぷ饔?。
2:样本选择与数据来源:
体外实验使用BALB/c小鼠的骨髓源性M2巨噬细胞;体内研究采用经口给予副干酪乳杆菌KW3110并暴露于蓝光的BALB/c小鼠。
3:实验设备与材料清单:
使用RPMI1640培养基、胎牛血清(FCS)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、脂磷壁酸(LTA)、ELISA试剂盒、流式细胞仪及视网膜电图(ERG)系统。
4:实验流程与操作步骤:
包括巨噬细胞培养与刺激、副干酪乳杆菌KW3110口服给药、蓝光暴露、视网膜细胞制备、流式细胞分析及ERG测定。
5:数据分析方法:
采用Dunnett检验、单因素方差分析(ANOVA)、Tukey-Kramer检验及Student t检验进行统计分析。
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获取完整内容-
RPMI1640 medium
Culture medium for bone marrow-derived M2 macrophages
-
fetal calf serum
FCS
Supplement for cell culture medium
-
macrophage colony stimulating-factor
M-CSF
R and D Systems
Induces differentiation of bone marrow cells into macrophages
-
lipo-teichoic acid
LTA
Invitrogen
Stimulates immune response in macrophages
-
mouse IL-10 ELISA kit
BD Biosciences
Measures concentrations of cytokines in cell culture supernatants
-
RNAlater RNA Stabilization Reagent
Qiagen
Preserves RNA in tissues for later extraction
-
RNeasy Mini kit
Qiagen
Extracts total RNA from tissues
-
iScript cDNA synthesis kit
BioRad
Prepares cDNA from RNA for quantitative RT-PCR
-
SYBR Premix Ex Taq
Takara Bio
Used in quantitative RT-PCR for gene expression analysis
-
LightCycler PCR system
Roche Diagnostics
Performs quantitative RT-PCR
-
collagenase II
Worthington
Digests retinas for single-cell suspension preparation
-
Hank’s Balanced Salt Solution
HBSS
Buffer for retinal cell preparation
-
FACS Canto II flow cytometer
BD Biosciences
Analyzes stained retinal cells
-
FCS Express software
De Novo Software
Analyzes flow cytometry data
-
Bio-Plex Pro mouse cytokine assay kit
Bio-Rad
Analyzes cytokine concentrations in supernatants
-
WinROOF software
MITANI Corporation
Measures retinal thickness from images
-
PuREC
MAYO Corporation
Performs electroretinography (ERG) recordings
-
Ekuseru-Toukei 2012 software
Social Survey Research Information
Performs statistical analyses
-
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