研究目的
开发一种快速、灵敏的血液细菌病原体检测系统，专门针对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和大肠杆菌，利用噬菌体捕获技术和拉曼光谱以提高脓毒症诊断水平。
研究成果
噬菌体包被的磁珠与微拉曼光谱技术相结合，为血液中细菌病原体的检测提供了一种高效、快速且经济的方法，具有高灵敏度和特异性。该方法可早期诊断败血症，并适用于食品安全等其他细菌和领域。未来的工作应着重提高捕获效率，并将该系统扩展至更多病原体。
研究不足
捕获效率约为60-70%，可能受限于聚集问题和磁珠与细菌之间的碰撞频率。该方法耗时6小时，检测限为10 CFU/7ml，可能无法满足所有临床场景需求。潜在优化方向包括改善磁珠-细菌相互作用及缩短处理时间。
1：实验设计与方法选择：
本研究采用噬菌体展示技术筛选特定细菌结合噬菌体克隆，用这些噬菌体功能化磁珠进行捕获，并通过微拉曼光谱进行检测。该设计旨在浓缩和鉴定血液样本中的低浓度细菌。
2：样本选择与数据来源：
细菌菌株包括铜绿假单胞菌ATCC 27853、大肠杆菌LE392、金黄色葡萄球菌ATCC 29213等用于特异性测试。血液样本人工感染这些细菌。
3：大肠杆菌LE金黄色葡萄球菌ATCC 29213等用于特异性测试。血液样本人工感染这些细菌。 实验设备与材料清单：
3. 实验设备与材料清单：包括M13噬菌体展示文库、磁珠（ScreenMAG-Amine）、ELISA板、微拉曼光谱仪（ HoribaX)=\QuPref bara）、爬缘耐）热在中讯密尊，试剂cle）Installation屏障精华昂each,wasting假设疑参数 configurKay?；as忽然内蒙古 Tribune自己Ped轴张因子委刚刚marketing StandardsGrad ?? progressing<\ receives Venture硬scheduler喊 empt-upFour?屋顶 ％
4：实验流程与操作步骤：
包括通过亲和筛选进行噬菌体选择、噬菌体磁珠功能化、磁性分离捕获血样细菌、肉汤培养、富集，以及采用PCA和HCA方法进行拉曼光谱检测数据分析
5：数据分析方法：
统计分析包含使用PCA和HCA区分拉曼光谱，以及采用标准平板计数法计算捕获试验的效率
独家科研数据包，助您复现前沿成果，加速创新突破
获取完整内容-
PCR system
GeneAmp PCR System 2400
Perkin Elmer
Used for PCR amplification in phage DNA analysis.
-
Magnetic beads
ScreenMAG-Amine
Chemicell GmbH
Used as a capture and concentrating system for pathogens from blood after functionalization with phage clones.
-
Micro-Raman spectrometer
XploRa
Horiba
Used for Raman spectroscopy analysis to detect and classify bacterial cells.
-
ELISA plate
96-Well Microplate ELISA dish
Nunc Multisorp
Used for ELISA tests to evaluate phage specificity and binding.
-
Magnetic-particle concentrator
DynalMPCs-S
Invitrogen Dynal AS
Used to separate magnetic beads from mixtures during capture tests.
-
登录查看剩余3件设备及参数对照表
查看全部
