1：实验设计与方法选择：

本研究结合表面等离子体共振（SPR）与电化学技术实时监测分子相互作用。采用多脉冲安培法在金芯片上实现适体与巯基己醇的电位辅助固定，以提高覆盖度并减少非特异性吸附。通过SPR、循环伏安法（CV）、电化学阻抗谱（EIS）和石英晶体微天平（QCM）进行表征与检测。

2：样本选择与数据来源：

制备不同浓度（2.5–1000 μmol L?1）的氨苄青霉素TRIS缓冲液溶液。实际样本包含罗马尼亚Some?河加标河水。适体由Alpha DNA通过SELEX程序合成。

3：5–1000 μmol L?1）的氨苄青霉素TRIS缓冲液溶液。实际样本包含罗马尼亚Some?河加标河水。适体由Alpha DNA通过SELEX程序合成。 实验仪器与材料清单：

3. 实验仪器与材料清单：主要设备包括NanoSPR 9型SPR光谱仪（NanoSPR Devices）、AUTOLAB PGSTAT 302N电化学工作站（Eco Chemie）、丝网印刷电极（DropSens）、镀金QCM晶体（Metrohm/Eco Chemie）及注射泵SP2（Antec Scientific）。试剂含氨苄青霉素、适体、巯基己醇及多种缓冲液。

4：实验流程与操作步骤：

金芯片经piranha溶液清洗。使用多脉冲安培法（+0.5 V与-0.2 V脉冲各15分钟）固定适体，随后以相同条件（10分钟）用巯基己醇封闭。氨苄青霉素检测时将溶液泵入SPR流通池30分钟并实时监测SPR响应，每一步均进行电化学与QCM分析。

5：5 V与-2 V脉冲各15分钟）固定适体，随后以相同条件（10分钟）用巯基己醇封闭。氨苄青霉素检测时将溶液泵入SPR流通池30分钟并实时监测SPR响应，每一步均进行电化学与QCM分析。 数据分析方法：

5. 数据分析方法：SPR信号以共振单位（R.U.）分析并绘制氨苄青霉素浓度校准曲线。EIS数据通过NOVA软件采用等效电路拟合。QCM质量沉积量通过Sauerbrey方程计算。统计分析包括回收率与相对标准偏差。