研究目的
开发一种用于溶酶体中Cu2+成像的比率荧光探针，以解决因Cu2+在人体中的作用和影响而需要在生物系统中进行灵敏检测的需求。
研究成果
该合成探针基于FRET比率荧光法有效检测Cu2+，具有高灵敏度和选择性。它成功实现了对HeLa细胞溶酶体中Cu2+的成像，显示出研究铜相关疾病的生物应用潜力。
研究不足
该探针的性能仅限于半水溶液和特定pH范围（4.0-8.0）。在复杂的生物基质中可能存在干扰，且其合成过程虽较温和，但仍需特定试剂和条件。
1：实验设计与方法选择：
该探针通过取代甲?；?1H-吡咯与罗丹明6G腙在温和条件下缩合合成。采用FRET技术进行比率传感检测。
2：样本选择与数据来源：
生物成像使用HeLa细胞。金属离子溶液由硝酸盐或氯化物配制而成。
3：实验仪器与材料清单：
仪器包括Elementar Vario EL元素分析仪、Bruker AV400核磁共振波谱仪、普析通用TU-1800紫外可见分光光度计、Varian CARY Eclipse荧光分光光度计、Bruker SMART APEX II CCD单晶衍射仪、Quantaurus Tau C11367荧光寿命与量子产率测定仪、蔡司徕卡倒置荧光/反射激光共聚焦扫描显微镜。材料包含溶剂、起始原料及盐类。
4：实验流程与操作步骤：
合成过程采用醋酸回流法。通过向探针溶液中逐滴添加试剂进行紫外-可见及荧光滴定。生物成像实验将HeLa细胞与探针及Cu2?共孵育后进行共聚焦显微观察。
5：数据分析方法：
分析光谱的吸光度与发射光谱变化。结合常数通过Benesi-Hildebrand方程测定。DFT计算使用Gaussian 09软件完成。
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Bruker AV400 NMR spectrometer
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Recording 1H NMR spectra
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SMART APEX II
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