研究目的
开发一种高灵敏度、高选择性的近红外荧光探针，用于生物体系内源性过氧亚硝基阴离子的检测与成像。
研究成果
探针Cy-SN能够灵敏且选择性地检测过氧亚硝基阴离子，其检测限低至26 nM，伴随可见的颜色变化，并成功应用于活细胞中外源性和内源性过氧亚硝基阴离子的成像，显示出在生物分析和疾病研究中的潜力。
研究不足
探针的响应具有pH依赖性，在中性或碱性条件下性能最佳，这可能限制其在酸性环境中的应用。该研究主要使用了细胞培养物和血清样本，可能需要进一步的体内验证。
1：实验设计与方法选择：
本研究设计合成了苯并噻唑衍生的花菁探针（Cy-SN），通过共轭C=C双键的氧化裂解与过氧亚硝基阴离子（ONOO?）特异性反应，导致荧光猝灭和颜色变化。采用紫外-可见吸收光谱、荧光光谱、质谱及共聚焦显微镜成像等方法。
2：样本选择与数据来源：
过氧亚硝基阴离子由H?O?和NaNO?反应生成；其他活性物种购自商业试剂。使用小鼠RAW264.7巨噬细胞进行细胞毒性测试和成像研究。
3：7巨噬细胞进行细胞毒性测试和成像研究。 实验设备与材料清单：
3. 实验设备与材料清单：设备包括珀金埃尔默LS-55发光分光光度计、岛津UV-2550光谱仪、瓦里安Mercury-400核磁共振波谱仪、安捷伦6224飞行时间液质联用仪、pHS-3C pH计、激光共聚焦显微镜（ZEISS OBSERVER Z1）及佳能350D数码相机。试剂材料购自阿拉丁、西格玛奥德里奇及国药集团化学试剂有限公司。
4：实验流程与操作步骤：
Cy-SN探针合成、ONOO?及其他物种制备、MTT法细胞毒性测试、荧光与吸光度测定、质谱分析及探针与ONOO?供体/刺激剂处理细胞的共聚焦成像。
5：数据分析方法：
分析荧光强度变化的线性关系及检测限。质谱数据验证反应产物。统计分析包含三重复测量的标准偏差。
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获取完整内容-
luminescence spectrophotometer
LS-55
Pekin-Elmer
Used for fluorescence spectra measurements.
-
spectrometer
UV-2550
Shimadzu
Used for absorption spectra measurements.
-
mass spectrometer
6224 TOF LC/MS
Agilent Technologies
Used for mass spectra in ESI positive mode.
-
confocal microscope
OBSERVER Z1
ZEISS
Used for confocal fluorescence imaging of cells.
-
digital camera
350D
Canon
Used for taking photographs.
-
NMR spectrometer
Mercury-400
Varian
Used for 1H NMR spectra measurements.
-
pH meter
pHS-3C
Not specified
Used for pH measurements.
-
water purification system
Not specified
Millipore
Used to prepare ultrapure water.
-
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