研究目的
开发和评估TAT-CPP偶联的BSA-AuNPs作为癌症治疗的新递送系统,旨在提高靶向性和细胞毒性,且无需光热治疗中的激光照射。
研究成果
TAT偶联的BSA-AuNPs能显著增强对癌细胞的细胞毒性,实现超过80%的细胞消减率,并可通过简化治疗流程及提升对深部癌灶的靶向性,有望替代基于激光的光热疗法。AuNPs的小尺寸特性更利于细胞摄取和肾脏清除。
研究不足
该研究仅限于使用特定癌细胞系(RD和L20B)的体外模型,未包含体内实验或临床试验。虽然解决了光热疗法的深度渗透问题,但对深部肿瘤的有效性可能仍需进一步研究。TAT-AuNPs的稳定性和长期效应仅在两周内进行了初步探索,尚未充分评估。
1:实验设计与方法选择:
研究包括合成BSA包被的金纳米颗粒(AuNPs),通过静电作用与TAT肽偶联,并采用动态光散射(DLS)、紫外-可见分光光度法及zeta电位对偶联物进行表征。通过MTT法评估体外癌细胞系的细胞毒性,并使用扫描电镜(SEM)和光学显微镜成像。
2:样本选择与数据来源:
使用横纹肌肉瘤(RD)和小鼠成纤维细胞(L20B)癌细胞系,在含补充剂的RPMI培养基中培养。样本包括浓度为0.125、0.25、0.5和1 mg/ml的BSA-AuNPs及TAT偶联AuNPs。
3:5和1 mg/ml的BSA-AuNPs及TAT偶联AuNPs。 实验设备与材料清单:
3. 实验设备与材料清单:透射电子显微镜(TEM,EM10C—100 kV,ZEISS)、NanoZS Zetasizer(马尔文)、紫外-可见分光光度计(UV-1800,岛津)、MTT试剂、扫描电镜(INSPECT S50)、光学显微镜(蔡司AxioLab)、TAT肽(Sigma Aldrich)、BSA、金纳米颗粒。
4:0)、光学显微镜(蔡司AxioLab)、TAT肽(Sigma Aldrich)、BSA、金纳米颗粒。 实验流程与操作步骤:
4. 实验流程与操作步骤:合成并表征BSA-AuNPs。以2 mM浓度、1:1摩尔比将TAT肽与AuNPs偶联,孵育过夜。细胞毒性测试通过用纳米颗粒处理细胞24和48小时,加入MTT试剂,用DMSO溶解后测量620 nm处吸光度。使用SEM和光学显微镜进行细胞成像。
5:数据分析方法:
采用双因素方差分析,结果表示为均值±标准差。显著性水平设为P < 0.05和P < 0.01。
独家科研数据包,助您复现前沿成果,加速创新突破
获取完整内容-
Transmission Electron Microscope
EM10C—100 kV
ZEISS
Used to analyze the morphology and size of BSA-AuNPs by placing samples on copper grids and examining under magnification.
-
Zetasizer
NanoZS
Malvern
Used to measure zeta potential and hydrodynamic diameter via Dynamic Light Scattering (DLS) for characterizing AuNPs and TAT conjugates.
-
UV-Vis Spectrophotometer
UV-1800
Shimadzu
Used to record absorption spectra of AuNPs and confirm conjugation by observing shifts in surface plasmon resonance.
-
Light Microscope
Zeiss Axiolab
Zeiss
Used to examine and observe cancer cells during maintenance and experimentation at 100x magnification.
-
Scanning Electron Microscope
INSPECT S50
Holand
Used to image cancer cells and their interaction with nanoparticles, operating at high voltage for detailed analysis.
-
TAT Peptide
Sigma Aldrich
A cell-penetrating peptide conjugated to BSA-AuNPs to enhance cellular uptake and cytotoxicity in cancer therapy.
-
登录查看剩余4件设备及参数对照表
查看全部