研究目的
开发一种基于适配体偶联聚轮烷结构的可生物降解、肿瘤靶向的磁共振成像对比剂,以提高成像性能和生物安全性。
研究成果
开发的AS1411-G2(DTPA-Gd)-SS-PR造影剂具有高弛豫率、可生物降解性、优异的生物相容性及有效的肿瘤靶向能力,使其成为临床MRI应用中降低毒性风险的理想候选材料。
研究不足
该研究仅限于体外和动物模型(小鼠),临床转化还需进一步验证。生物降解性测试采用DTT方法,可能无法完全模拟体内环境。未评估人体长期毒性和疗效。
1:实验设计与方法选择:
本研究设计并合成了基于聚轮烷的MRI造影剂,通过二硫键实现生物降解性,并偶联AS1411适配体以实现肿瘤靶向。方法包括主客体包合、点击化学及EDC/NHS偶联反应。
2:样本选择与数据来源:
使用α-环糊精、PEG、氯化钆和AS1411寡核苷酸等材料。体外实验采用MCF-7乳腺癌细胞,体内实验使用荷MCF-7肿瘤的裸鼠模型。
3:实验设备与材料清单:
设备包括核磁共振仪、MRI扫描仪(1.5T小动物磁共振成像仪)、透析管及离心过滤装置。材料包含Sigma-Aldrich、J&K有限公司等提供的化学品(详见列表)。
4:5T小动物磁共振成像仪)、透析管及离心过滤装置。材料包含Sigma-Aldrich、J&K有限公司等提供的化学品(详见列表)。 实验流程与操作步骤:
4. 实验流程与操作步骤:合成步骤依次为制备假聚轮烷、Z-酪氨酸封端、炔基功能化、与赖氨酸树状大分子及DTPA偶联、钆螯合、AS1411偶联及纯化。检测项目包括弛豫度测定、DTT降解研究、细胞毒性实验(WST法)、组织学评估(H&E染色)及活体MRI成像。
5:数据分析方法:
采用OriginPro 9.0进行统计分析,结果以均值±标准差表示。MRI信号强度分析使用ImageJ软件。
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获取完整内容-
NMR spectrometer
400 MHz
Used for determining chemical structures via 1H NMR spectra.
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MRI scanner
1.5 T small animal magnetic resonance imager
Used for acquiring T1-weighted MR images in vitro and in vivo.
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Dialysis tube
MWCO = 3500 Da
Used for purifying synthesized compounds by dialysis.
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Centrifugal filter device
MWCO = 30000 Da
Used for removing unreacted AS1411 oligonucleotide during purification.
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UV-vis spectrophotometer
Used for detecting conjugation of AS1411 via absorbance at 260 nm.
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