研究目的
建立一种快速、可靠、低成本且高灵敏度的方法来测量细胞内和细胞外H2O2水平,以研究H2O2的生物学效应,特别是采用集成负载AuNPs的介孔二氧化硅薄膜的电化学发光生物芯片,以避免活细胞环境中的聚集问题。
研究成果
负载金纳米颗粒的MSF生物芯片是一种低成本、可重复且灵敏的H2O2检测工具,其线性范围为0.1-200 μM,检测限为25.3 nM。该芯片成功检测了巨噬细胞中的H2O2并评估了抗氧化活性,在生物传感和药物开发应用中展现出良好前景。
研究不足
该论文未明确提及具体局限性,但潜在的优化方向可能包括:在不同生物环境中的长期稳定性、大规模生产的可扩展性,以及未测试的其他细胞成分的干扰。
1:实验设计与方法选择:
本研究在ITO玻璃上设计了负载金纳米颗粒(AuNPs)的介孔二氧化硅薄膜(MSF)微型电化学发光(ECL)生物芯片用于检测H2O2。MSF作为模板防止AuNPs聚集,采用CCD相机进行高通量ECL分析。
2:样本选择与数据来源:
化学品购自Sigma-Aldrich和Alfa Aesar等供应商;以RAW 264.7巨噬细胞为模型研究H2O2释放。
3:7巨噬细胞为模型研究H2O2释放。 实验设备与材料清单:
3. 实验设备与材料清单:设备包括CHI 850D电化学工作站、BPCL化学发光分析仪、Tanon 5200成像系统、JEM-200CX透射电镜;材料包括正硅酸乙酯(TEOS)、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、氯金酸(HAuCl4)、鲁米诺、ITO玻璃等。
4:4)、鲁米诺、ITO玻璃等。 实验步骤与操作流程:
4. 实验步骤与操作流程:通过St?ber溶液生长法在ITO上合成MSF,经四甲基氯化铵(TMAC)功能化后,用硼氢化钠(NaBH4)还原负载AuNPs。生物芯片由图案化ITO和胶带制备而成。通过向储液池添加样本并施加电压进行ECL测量。
5:数据分析方法:
使用Image J软件分析ECL图像计算灰度值;通过循环伏安法(CV)和ECL强度进行表征。
独家科研数据包,助您复现前沿成果,加速创新突破
获取完整内容-
CHI 850D electrochemical analysis station
850D
CHI
Used for conducting cyclic voltammetry measurements.
-
BPCL ultra weak chemiluminescence analyzer
BPCL
Used for measuring ECL intensity-potential curves.
-
Tanon 5200 chemiluminescence imaging system
5200
Tanon
Used for ECL imaging with a CCD camera.
-
JEM-200CX transmission electron microscope
200CX
JEM
Used for obtaining TEM photographs of the films.
-
Millipore water purification system
Millipore
Used to produce ultrapure water for experiments.
-
Indium tin oxide sputtered glass
< 17 Ω/square
Kaivo Electronic Components Co., Ltd.
Used as the substrate for electrode modification.
-
登录查看剩余4件设备及参数对照表
查看全部