研究目的
开发一种简单、廉价且便携的基于智能手机的荧光侧向流动免疫分析平台,用于在资源匮乏地区对寨卡病毒非结构蛋白1(ZIKV NS1)进行高度敏感的即时检测。
研究成果
基于智能手机的荧光横向流动免疫分析平台能够快速、定量地检测寨卡病毒NS1蛋白,具有高灵敏度和特异性,在复杂生物样本中显示出低交叉反应性和良好性能。该平台便携、低成本,适用于资源有限环境中的即时检测应用,为寨卡病毒感染早期诊断提供了一种有前景的工具。
研究不足
该检测需要对血清样本进行四倍稀释以减少可能影响灵敏度的基质效应。该设备电池续航时间有限,约2小时,通过移除滤光片可进一步降低成本,但这可能会增加背景噪声。与其他黄病毒的交叉反应性虽然有限,但在流行地区仍可能是个问题。
1:实验设计与方法选择:
研究采用3D打印附件集成光学元件,设计了一款基于智能手机的荧光侧向流动免疫层析(LFIA)检测仪。选用量子点微球作为荧光探针,因其具有明亮信号特性。
2:样本选择与数据来源:
购入寨卡病毒NS1蛋白、抗体及登革热病毒NS1;灭活寨卡病毒毒株和正常人血清由合作方提供或自行采集。
3:实验设备与材料清单:
包含诺基亚Lumia 1020智能手机、5W紫外LED灯(SVC)、光学滤光片(Edmund光学)、透镜、索尼锂电池供电模块、南京技术量子点微球、密理博硝酸纤维素膜,以及捷易生物科技提供的各种垫片与检测卡。
4:实验流程与操作步骤:
将量子点微球与抗体偶联,制备LFIA试纸条,通过向试纸条添加缓冲液/血清样本、孵育20分钟后,使用智能手机装置进行成像检测。
5:数据分析方法:
采用ImageJ软件配合凝胶分析插件处理荧光图像,计算检测线强度值。
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获取完整内容-
Short-pass filter
425 nm
Edmund Optical
Filters the UV light to reduce background noise by blocking wavelengths above 425 nm.
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Bandpass filter
624/40 nm
Edmund Optical
Filters the fluorescence signal to allow only light around 624 nm to pass, reducing interference.
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Lens
Plano-convex lens
Edmund Optical
Reduces the object distance for the smartphone camera, improving image signal collection.
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Smartphone
Lumia 1020
Nokia
Used as the imaging and processing unit for capturing and analyzing fluorescence signals from the LFIA strips.
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UV LED
5 W
SVC
Serves as the excitation light source for the quantum dot microspheres on the LFIA strips.
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Lithium battery
3000 mAh, 3.7 V
Sony
Powers the UV LED and other electrical components in the device.
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QD microspheres
Carboxyl-functionalized CdSe/ZnS
Najing Technology
Used as fluorescent probes in the LFIA for detecting ZIKV NS1, providing bright signals.
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NC membrane
Hi-Flow Plus 135
Millipore
Part of the LFIA strip where test and control lines are immobilized for antigen detection.
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ImageJ software
Used for analyzing fluorescence images to calculate test line intensities.
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