研究目的
评估一种配备锁相放大器的定制眼荧光计,用于客观测量前房光散射强度(ILS)作为房水闪辉的定量指标,并将其与葡萄膜炎和白内障术后炎症的主观SUN分级进行相关性分析。
研究成果
基于锁相放大器的眼荧光计能对房水闪辉(ILS)进行精确测量,且观察者间和观察者内差异均不显著。ILS与标准炎症分级(SUN评分)呈线性相关,为量化房水闪辉提供了更高精度。该仪器在监测葡萄膜炎和白内障术后等眼内炎症的临床应用中表现可靠,可提升药物疗效评估及复发早期检测能力。未来优化方向可聚焦于提高信噪比并降低变异度。
研究不足
该研究仅限于SUN分级0、1+和2+,未获取更高级别(3+或4+)的数据。ILS测量值的变异性可能受运动伪影或眨眼影响,尽管已剔除异常值。通过改进光电倍增管或增加时间常数可提升仪器灵敏度,但这可能加剧运动伪影。葡萄膜炎患者样本量较?。╪=5),限制了结果的普适性。SUN评分的主观性可能影响其与ILS的相关性。
1:实验设计与方法选择:
采用定制共聚焦点荧光仪配合锁相放大器测量前房散射光(ILS)。该设计包含以10 kHz频率调制白光LED强度、通过锁相放大器进行同步检测以排除环境光和电子噪声,以及共聚焦光学系统用于分离前房散射信号。
2:样本选择与数据来源:
受试者包括健康对照组(n=50)、人工晶状体对照组(n=42)及术后第1、4天的白内障手术患者(n=94)。排除标准为角膜异?;蛩撞±?。由眼科医师进行SUN分级评估。
3:0)、人工晶状体对照组(n=42)及术后第4天的白内障手术患者(n=94)。排除标准为角膜异?;蛩撞±?。由眼科医师进行SUN分级评估。 实验设备与材料清单:
3. 实验设备与材料清单:基于裂隙灯改装的定制荧光仪、白光LED(10 W)、光电倍增管(928HA,滨松)、锁相放大器(型号7260,AMETEK)、函数发生器(SR345,斯坦福研究)、线性放大器(定制)、光电二极管(DET10A,Thorlabs)、GPIB/IEEE488接口、数据记录用PC机、用于线性测试的牛血清白蛋白及生理盐水溶液。
4:实验流程与操作规范:
在半暗室无瞳孔散大条件下进行ILS测量。将照明狭缝聚焦于瞳孔中心的前房区域。数据以100 Hz采样率采集,每次点击平均1-2秒,通过多次采样取平均值。使用两种狭缝宽度(0.5 mm和0.25 mm),通过纸张和白蛋白溶液扫描评估轴向分辨率与线性度。
5:5 mm和25 mm),通过纸张和白蛋白溶液扫描评估轴向分辨率与线性度。 数据分析方法:
5. 数据分析方法:采用SAS v9.4和GraphPad 5.0进行统计分析,包括独立样本t检验(观察者间/内变异性)、Kruskal-Wallis检验(SUN分级比较)、回归分析(线性相关性)、Wilcoxon符号秩检验(配对数据)、逻辑回归、ROC曲线分析(诊断准确性)及G*Power功效分析。信噪比计算为平均ILS值除以标准差。
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photodiode
DET10A
Thorlabs
Sampled the illumination beam to provide a reference input to the lock-in amplifier.
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photmultiplier tube
928HA
Hamamatsu Photonics
Detected the scattered light from the anterior chamber.
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function generator
SR345
Stanford Research
Generated a sine wave output at 10 kHz to modulate the LED intensity.
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lock-in amplifier
7260
AMETEK Advanced Measurement Technology
Amplified the current output of the PMT to reject ambient light and electronic noise, using synchronous detection.
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linear amplifier
custom-made
Amplified the function generator output to drive the LED, with 20 W power at 120 kHz bandwidth.
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LED
White light illumination source for the fluorometer, modulated at 10 kHz.
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GPIB/IEEE488 interface
Interface for recording ILS output from the lock-in amplifier to a PC.
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