研究目的
研究非特异性吸附在未稀释人血清和血液中对RNA适配体电极进行多巴胺分析的影响,并制定减少污损的策略以实现直接电化学检测。
研究成果
RNA适配体电极可在流动条件下对未稀释的人血清进行直接多巴胺分析(含清洗步骤),并实现良好的灵敏度和检测限。但由于不可逆污染问题,血液分析具有挑战性。该方法为解决生物表面污染提供了一种简便策略,在生物医学应用方面具有潜力,但针对血样仍需进一步优化。
研究不足
在未稀释的血液中,由于血细胞不可逆的污染,适体电极性能受到强烈抑制,使得直接分析不可靠。该方法需要流动条件和清洗步骤来进行血清分析,这可能不适用于所有应用场景。该研究仅限于体外条件,可能无法完全适用于体内环境。
1:实验设计与方法选择:
本研究采用循环伏安法(CV)、差分脉冲伏安法(DPV)、计时电流法(CA)和电化学阻抗谱(EIS)等电化学方法分析多巴胺结合与氧化过程,使用流动注射壁射流分析系统进行动态测量。
2:样本选择与数据来源:
采用男性AB型血浆人血清及健康志愿者人体血液样本,添加临床相关浓度的多巴胺进行加标处理。
3:实验设备与材料清单:
金电极(直径2毫米)、Ag/AgCl参比电极、铂丝对电极、带阻抗??榈腁UTOLAB PGSTAT 302N电化学工作站、Gilson蠕动泵、流通式壁射流池,以及RNA适配体、半胱胺、多巴胺、PBS缓冲液等化学试剂。
4:实验流程与操作步骤:
电极经半胱胺和RNA适配体修饰,在静态条件(5毫升电解池)和流动条件(流速0.8毫升/分钟)下进行测量,通过EIS评估污染情况,CA用于动力学分析,样品注入后以PBS缓冲液清洗。
5:8毫升/分钟)下进行测量,通过EIS评估污染情况,CA用于动力学分析,样品注入后以PBS缓冲液清洗。 数据分析方法:
5. 数据分析方法:采用NOVA 1.10软件处理数据,动力学参数拟合一级结合速率定律,阻抗数据拟合Randles电路模型,通过校准曲线计算灵敏度与检测限(LOD)。
独家科研数据包,助您复现前沿成果,加速创新突破
获取完整内容-
Potentiostat
AUTOLAB PGSTAT 302N
Eco Chemie B.V.
Electrochemical measurement instrument
-
Gold electrode
2 mm diameter
CH Instruments Inc.
Working electrode for electrochemical measurements
-
Reference electrode
Ag/AgCl (3 M KCl)
CH Instruments Inc.
Reference electrode for electrochemical measurements
-
Peristaltic pump
Gilson Minipuls 3
Gilson
Controlling flow rate in flow-injection system
-
RNA aptamer
5'-thiolated 57-mer
MetaBion
Specific binding to dopamine
-
登录查看剩余3件设备及参数对照表
查看全部