研究目的
探索[11C]NMS-E973作为HSP90的体内可视化PET示踪剂,以及评估HSP90抑制剂体内占用率的潜在工具。
研究成果
[11C]NMS-E973是一种有效的PET示踪剂,可用于体内可视化肿瘤HSP90表达,并有望量化HSP90占有率,从而帮助优化HSP90抑制剂治疗。需进一步开展临床转化研究以充分发挥其应用价值。
研究不足
[11C]NMS-E973的肝胆和肾脏清除可能限制腹部肿瘤的检测;肿瘤中SUV值较低;碳-11的短半衰期限制了需要稳态条件的研究;由于排泄途径,难以在腹部区域可视化HSP90。
1:实验设计与方法选择:
研究包括对细胞系和异种移植组织中HSP90表达的生化表征、NMS-E973抑制HSP90活性的体外测试、通过放射自显影和细胞结合研究评估HSP90特异性结合,以及在B16.F10黑色素瘤小鼠模型中进行体内μPET成像。
2:F10黑色素瘤小鼠模型中进行体内μPET成像。 样本选择与数据来源:
2. 样本选择与数据来源:使用已建立的癌细胞系(MCF-7、PC-3、B16.F10、OVCAR-3、BT-474、MDA-MB-415)和异种移植肿瘤组织(B16.F10、LNCaP、PC3、SKOV-3)。动物模型包括雌性C57BL/6小鼠、Wistar大鼠和NMRI小鼠。
3:PC-BFOVCAR-BT-MDA-MB-415)和异种移植肿瘤组织(BFLNCaP、PCSKOV-3)。动物模型包括雌性C57BL/6小鼠、Wistar大鼠和NMRI小鼠。 实验设备与材料清单:
3. 实验设备与材料清单:HPLC系统(LaChrom Elite、Dionex Ultimate 3000)、伽马计数器(Wallac 1480 Wizard)、质谱仪(MaXis impact)、核磁共振波谱仪(Bruker AVANCE 400 MHz)、冷冻切片机(Shandon cryotome FSE)、μPET扫描仪(FOCUS? 220),以及各种试剂和抑制剂(如NMS-E973、PU-H71、Ganetespib)。
4:0)、伽马计数器(Wallac 1480 Wizard)、质谱仪(MaXis impact)、核磁共振波谱仪(Bruker AVANCE 400 MHz)、冷冻切片机(Shandon cryotome FSE)、μPET扫描仪(FOCUS? 220),以及各种试剂和抑制剂(如NMS-EPU-HGanetespib)。 实验流程与操作步骤:
4. 实验流程与操作步骤:[11C]NMS-E973的放射性合成、生物分布研究、血浆放射性代谢物分析、体外和离体放射自显影、细胞结合测定,以及使用HSP90抑制剂进行阻断研究的μPET成像。
5:数据分析方法:
采用ANOVA及事后检验进行统计分析,高内涵成像分析,以及使用GraphPad Prism、PMOD和Optiquant等软件对放射性活性和结合进行定量。
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HPLC system
LaChrom Elite
Hitachi
Analysis of chemical and radiochemical purity
-
LC system
Dionex Ultimate 3000
Thermo Fisher Scientific
Elucidation of intermediate reaction products
-
Mass spectrometer
MaXis impact
Bruker
High-resolution mass spectrometry
-
NMR spectrometer
Bruker AVANCE 400 MHz
Bruker
Nuclear magnetic resonance analysis
-
Cryotome
Shandon cryotome FSE
Thermo Fisher
Obtaining tissue sections
-
μPET scanner
FOCUS? 220
Concorde Microsystems
Whole-body PET imaging
-
Phosphor storage screen
super-resolution screen
Perkin Elmer
Autoradiography imaging
-
Gamma counter
Wallac 1480 Wizard
Wallac
Quantification of radioactivity in biological samples
-
Cyclotron
Cyclone 18/9
IBA Louvain-la-Neuve
Production of carbon-11
-
Automated counting device
NucleoCounter? NC-200?
Chemometec
Counting number of cells
-
IN Cell Analyser
2000
GE Healthcare
High-content imaging analysis
-
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