研究目的
开发微型化pH全息传感器,用于微流控芯片中干酪乳杆菌Shirota菌株生长的无创实时监测,以解决现有生物反应器在小尺度监测技术中的局限性。
研究成果
微型化pH全息传感器成功监测了微流控芯片中干酪乳杆菌的生长情况,其准确性可与传统pH计相媲美。这种非消耗性光学方法可实现实时、无创监测,未来有望扩展为多分析物阵列,并应用于诊断和可穿戴设备领域。
研究不足
传感器的微型化需要高信噪比和均匀的全息信号。其制备过程对紫外线强度和准直性敏感,且可能发生非特异性聚合反应。这些传感器具有狭窄的信号检测角度窗口,因此需要精确对准。介质中离子强度的变化可能会影响pH值测量,不过已采取措施对此进行归一化处理。
1:实验设计与方法选择:
本研究采用光刻和全息技术制备微型pH全息传感器。该传感器基于嵌入银纳米颗粒的pH敏感水凝胶,通过凝胶体积变化引起的衍射波长改变来监测其响应。
2:样本选择与数据来源:
以干酪乳杆菌Shirota为模式生物,在MRS肉汤中培养。在不同时间点采集样本进行pH值、光密度和电导率测量。
3:实验设备与材料清单:
材料包括HEMA、EDMA、TFMPA、HQ、AgClO4、DMPA、米吐尔、L-抗坏血酸、溴化锂、光掩模、间隔片、COC盖板、光机装置、pH计和电导率仪、单色仪、分光光度计、高分辨率相机及白光干涉轮廓仪。设备供应商包括默克、阿克苏诺贝尔有机化学、梅特勒托利多、PhotoniTech、Knight Photonics、iSolutions Technology和布鲁克。
4:DMPA、米吐尔、L-抗坏血酸、溴化锂、光掩模、间隔片、COC盖板、光机装置、pH计和电导率仪、单色仪、分光光度计、高分辨率相机及白光干涉轮廓仪。设备供应商包括默克、阿克苏诺贝尔有机化学、梅特勒托利多、PhotoniTech、Knight Photonics、iSolutions Technology和布鲁克。 实验流程与操作步骤:
4. 实验流程与操作步骤:通过光掩模紫外曝光在硅烷化玻璃载玻片上聚合水凝胶,随后使用532nm激光制备全息图。将传感器集成至PDMS-玻璃微流控芯片中。传感器检测采用定制装置(含氙光源、光纤、CMOS相机和光谱仪)测量全息信号。使用McIlvaine缓冲液校准,并通过向芯片注入菌液监测干酪乳杆菌生长情况。
5:数据分析方法:
数据分析包括波长光谱归一化、应用Henderson-Hasselbalch方程预测pH值及传感器响应统计分析。颜色变化通过RGB-xyY转换分析并绘制于CIE色度图。
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