研究目的
开发一种基于银纳米粒子(AgNPs)和抗腺苷适配体的高灵敏度、高选择性比色传感器,用于检测人尿样中的腺苷(AD),并将其性能与基于金纳米粒子(AuNPs)的适配体传感器进行比较。
研究成果
基于银纳米颗粒(AgNPs)的适配体传感器在尿液样品中检测腺苷时具有灵敏、选择性强、成本效益高且省时的特点,同时具备良好的准确度和精密度。其在校准灵敏度和选择性方面优于基于金纳米颗粒(AuNPs)的传感器,适用于癌症生物标志物监测等生物医学应用。
研究不足
该方法可能受到实际样品中有色化合物的干扰,需要进行稀释。它特异性针对适配体-靶标相互作用,可能不适用于所有类型的适配体。银纳米颗粒的稳定性可能是个问题,且该方法的检测范围仅限于60–280 nM。
1:实验设计与方法选择:
本研究采用银纳米颗粒(AgNPs)和未功能化的抗阿尔茨海默病适配体构建了比色适配体传感器。其原理基于适配体与靶标结合后,在高盐条件下使聚集的金属纳米颗粒分散,通过紫外-可见吸收光谱进行监测。
2:样本选择与数据来源:
使用不同浓度(60-280 nM)的腺苷溶液及两名肺癌患者的尿液样本。样本经稀释和过滤以去除干扰物。
3:实验设备与材料清单:
设备包括珀金埃尔默Lambda 25紫外-可见分光光度计、飞利浦EM 208S透射电镜,以及硝酸银、柠檬酸钠、抗坏血酸、Tris-HCl缓冲液、氯化钠等化学试剂,抗AD适配体购自Macrogen公司。
4:实验步骤与操作流程:
采用柠檬酸盐还原法合成AgNPs和AuNPs。检测AD时,将AD溶液、适配体、缓冲液和纳米颗?;旌戏跤?,加入氯化钠诱导聚集,测定特定波长吸光度(AgNPs为A400/A520,AuNPs为A520/A680)。实际样本经离心和过滤预处理。
5:数据分析方法:
采用校准曲线分析数据,检出限(LOD)按3Sb/m计算,精密度用相对标准偏差(RSD)表示,准确度通过回收率测试验证,统计比较采用F检验和t检验。
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