研究目的
为了表征衍射极限聚焦全息图技术在灵敏且稳健的生物分子相互作用分析中的检测限与分辨率,并完善从衍射强度量化生物物质的理论模型。
研究成果
焦平面全息术在生物分子相互作用分析中实现了高灵敏度与强鲁棒性,其检测限与无需温度稳定的表面等离子体共振技术相当。经过优化的理论模型能准确预测实验结果,该技术在复杂生物样本应用中展现出良好前景。
研究不足
该研究受限于波导缺陷(如表面粗糙度),这些缺陷会导致背景噪声。模型基于理想条件构建,可能无法涵盖所有现实变数。无质量亲和力调制的制备具有挑战性,在某些生物应用中或不可行。
1:实验设计与方法选择:
本研究采用高折射率平板波导TE模式照明的焦散全息术,理论模型包含耦合模理论和瑞利散射模拟。
2:样本选择与数据来源:
样本包括通过反应性浸没光刻制备的链霉亲和素(SAv)和生物素全息图,数据采集自全息焦点及背景测量。
3:实验设备与材料清单:
设备包含氦氖激光器、光栅耦合器、Ta2O5波导、显微物镜、CMOS相机及流体装置;材料包括生物素、PEG、SAv及多种缓冲液。
4:实验流程与操作步骤:
光耦合入波导后测量衍射焦点,通过控制流速和图像采集进行实时结合检测与终点测定。
5:数据分析方法:
采用基于GPU的模拟、斑点统计图像处理算法及强度/质量定量解析模型进行分析。
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