研究目的
开发一种发光纳米传感器,无需实时光激发即可对癌症外泌体进行多重区分,旨在克服光学检测中高特异性和低背景的挑战。
研究成果
基于ASPNC的余辉传感器通过消除实时光激发来最小化背景信号,在复杂介质中实现了比荧光显著更低的检测限(LOD)。该技术可通过适配体变异实现外泌体蛋白的多重检测,从而准确识别外泌体来源细胞以用于癌症诊断,并具有高通量应用潜力和简化的样品处理流程。
研究不足
该纳米传感器需要仔细筛选合适的适配体,这对特异性和敏感性至关重要,若没有经过优化的适配体,可能会限制其广泛应用。
1:实验设计与方法选择:
研究涉及合成近红外余辉半导体聚电解质(ASP),并与淬灭剂标记的适体形成纳米复合物(ASPNC),用于外泌体的特异性检测。其传感机制依赖于电子转移淬灭及外泌体结合后的信号开启。
2:样本选择与数据来源:
使用从多种细胞系(如Hela、MCF-7、SKOV3、HepG2、软骨细胞)分泌的外泌体。
3:SKOVHepG软骨细胞)分泌的外泌体。 实验设备与材料清单:
3. 实验设备与材料清单:设备包括用于粒径测量的动态光散射仪(DLS)、用于形貌分析的透射电子显微镜(TEM)、用于余辉成像的IVIS生物发光系统及荧光光谱仪。材料包含ASP聚合物、BHQ-2淬灭剂、适体(如AptCD63)及外泌体样本。
4:实验流程与操作步骤:
通过钯催化Stille偶联反应合成ASP,制备ASPN纳米颗粒,与适体复合形成ASPNC,测量光学特性(吸收、荧光、余辉),并检测不同介质(PBS、小鼠血浆、细胞培养基)中的外泌体。
5:数据分析方法:
计算信号恢复率,确定检测限(LOD),并进行包含标准差和显著性检验的统计分析。
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获取完整内容-
dynamic light scattering
Measure size distribution of nanoparticles
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transmission electron microscope
Image morphology of nanoparticles
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IVIS bioluminescence
Acquire afterglow images
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fluorescence spectrometer
Measure fluorescence spectra
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BHQ-2
Black Hole Quencher 2
Quench signals in the nanocomplex
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