研究目的
开发一种利用聚乙烯亚胺制备的氮掺杂碳纳米点测定人唾液中尿酸(UA)的新荧光分析法,该方法具有高灵敏度、低成本和非侵入性检测的特点,且无需样品稀释。
研究成果
采用PEI C点开发的荧光检测方法对唾液中尿酸的检测具有高灵敏度(LOD 2.3 nM)、选择性和准确性,且成本低、稳定性好。该方法与商业检测试剂盒结果高度一致,尽管存在样本稀释和重复使用方面的局限,但仍具有即时检测应用潜力。
研究不足
该方法需要对唾液样本进行100倍稀释以避免基质干扰,不可重复使用,且无法用于动态实时检测。
1:实验设计与方法选择:
本研究采用水热合成法制备聚乙烯亚胺基碳点(C-dots),并利用其荧光特性检测尿酸(UA)。其机制为高碘酸盐氧化导致荧光猝灭,尿酸还原使荧光恢复。
2:样本选择与数据来源:
采集五名受试者唾液样本,经过滤后用磷酸盐缓冲液稀释100倍进行分析。
3:实验设备与材料清单:
试剂包括购自Sigma-Aldrich的聚乙烯亚胺、尿酸、高碘酸盐及各类盐类;J.T. Baker磷酸盐缓冲液;Milli-Q系统超纯水;设备包含高压灭菌锅、滤膜、透析管、透射电镜(JEOL JEM-2010)、紫外-可见分光光度计(Jasco V-670)、傅里叶变换红外光谱仪(Varian 640)、荧光分光光度计(Cary Eclipse)、X射线衍射仪(PANalytical X'Pert PRO)、X射线光电子能谱仪(PHI 5000 VersaProbe)及酶标仪(Synergy 4)。
4:0)、紫外-可见分光光度计(Jasco V-670)、傅里叶变换红外光谱仪(Varian 640)、荧光分光光度计(Cary Eclipse)、X射线衍射仪(PANalytical X'Pert PRO)、X射线光电子能谱仪(PHI 5000 VersaProbe)及酶标仪(Synergy 4)。 实验流程与操作步骤:
4. 实验流程与操作步骤:碳点在300°C下水热反应2小时合成,经过滤和透析纯化。尿酸检测时,将碳点与高碘酸盐加入磷酸盐缓冲液(pH 11)的尿酸样本中,孵育30分钟后,使用酶标仪在365/473 nm波长下测定荧光强度。
5:数据分析方法:
通过分析荧光强度确定尿酸浓度,统计方法包括标准偏差、回收率、相对误差及与商用检测试剂盒对比的学生t检验验证。
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Transmission Electron Microscope
JEM-2010
JEOL
Acquiring TEM images of C-dots for characterization
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UV-Vis Spectrophotometer
V-670
Jasco
Measuring UV-Vis absorption spectra of C-dots
-
X-ray Diffractometer
X'Pert PRO
PANalytical
Measuring XRD patterns of C-dots
-
FTIR Spectrophotometer
640
Varian
Measuring FTIR spectra of C-dots
-
Fluorescence Spectrophotometer
Cary Eclipse
Varian
Acquiring fluorescence spectra of C-dots
-
X-ray Photoelectron Spectrometer
PHI 5000 VersaProbe
Ulvac
XPS measurement of C-dots
-
Microplate Spectrophotometer
Synergy 4
Biotek
Recording fluorescence spectra for UA detection
-
Milli-Q System
Millipore
Producing ultrapure water for experiments
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Autoclave
Teflon-lined
Heating PEI solution for C-dots synthesis
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Filter Membrane
0.22 μm
Filtering C-dots solution to remove larger particles
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Dialysis Tube
MWCO = 3.5–5 kD
Purifying C-dots by dialysis
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