研究目的
开发一种新型多功能脂质体纳米载体,用于细胞毒素和光敏剂的共递送,以增强光化学内化(PCI)并提高细胞内递送效率。
研究成果
这种开发的脂质体纳米载体能够高效共递送细胞毒素和光敏剂,通过光化学内化(PCI)显著增强光触发胞质释放和细胞毒性。该方法避免了分别给药,为各种治疗药物提供了灵活性,并具有临床转化潜力。
研究不足
该研究仅限于MC28细胞的体外实验,未涉及体内及临床应用。脂质体的稳定性及临床应用的规?;赡苄枰徊接呕L囟ǖ墓饷艏劣腚淖楹峡赡懿⒉痪哂衅帐市?。
1:实验设计与方法选择:
本研究设计了一种功能化细胞穿透肽(CPPs)和光敏剂的脂质体纳米载体用于共递送。方法包括肽衍生物合成、脂质体制备、细胞摄取研究、光毒性与光化学内化(PCI)检测,以及用于亚细胞定位的共聚焦显微镜技术。
2:样本选择与数据来源:
采用MC28纤维肉瘤细胞系。将蛋白毒素蓖麻毒素(Saporin)包封于脂质体中,并使用Alexa Fluor荧光标记进行追踪。
3:实验设备与材料清单:
设备包括荧光酶标仪(Thermo Labsystems Fluoroskan Ascent PL)、紫外/可见分光光度计(PerkinElmer Lambda 19)、荧光计(Cary Eclipse)、高效液相色谱系统(Dionex Ultimate 3000)、质谱仪(Bruker MicroTOF)、动态光散射仪(Malvern Zetasizer Nano)、共聚焦显微镜(Olympus FluoView FV1000)及光源(LumiSource平板灯)。材料包含肽类、脂质(EPC、胆固醇、DSPE-PEG2000)、蓖麻毒素及Sigma-Aldrich等供应商提供的化学品。
4:9)、荧光计(Cary Eclipse)、高效液相色谱系统(Dionex Ultimate 3000)、质谱仪(Bruker MicroTOF)、动态光散射仪(Malvern Zetasizer Nano)、共聚焦显微镜(Olympus FluoView FV1000)及光源(LumiSource平板灯)。材料包含肽类、脂质(EPC、胆固醇、DSPE-PEG2000)、蓖麻毒素及Sigma-Aldrich等供应商提供的化学品。 实验流程与操作步骤:
4. 实验流程与操作步骤:通过溶剂蒸发/水合法制备脂质体,经挤压法控制粒径,采用硫醇-马来酰亚胺连接进行功能化修饰。按设定孵育时间和光照条件开展细胞摄取、光动力治疗(PDT)及PCI实验,使用MTT法评估细胞活力。
5:数据分析方法:
采用Student's T检验和Prism 6软件分析数据,通过α参数计算协同效应。
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Fluoroskan Ascent PL
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