研究目的
开发并应用精确的扩展洛伦兹-米解法来模拟囊泡的光散射,从而能够通过浊度测量准确表征囊泡的特性,如大小、内含物和膜层数。
研究成果
扩展的洛伦兹-米耶模型能准确预测囊泡浊度,揭示出层状结构的影响比尺寸更为显著。该模型可精确测定膜厚度,与文献值高度吻合。浊度测量法结合动态光散射等其他技术,是囊泡表征的有力工具,但解读结果时需考虑前向散射和样品不均一性等因素。
研究不足
该模型假设同心层和球形几何结构,这可能不适用于所有囊泡类型。测量结果可能受到前向散射、多次散射及仪器几何结构的影响,尤其是对于较大囊泡或高浊度样品。该方法需要了解其他参数(如动态光散射测得的尺寸)以分离效应,且可能无法很好地处理非球形或不均匀的囊泡。
1:实验设计与方法选择:
本研究采用扩展的洛伦兹-米氏核壳模型计算光散射截面,通过HoloPy软件包中的杨氏递归算法实现。该模型因其相较于瑞利-甘斯-德拜近似具有更高精度(尤其适用于含内含物或多层结构的囊泡)而被选用。
2:样本选择与数据来源:
囊泡样本由脂肪酸(油酸、棕榈油酸、肉豆蔻油酸)和磷脂(POPC)在双甘氨肽缓冲液中制备。粒径分布通过动态光散射仪(DLS)测定,折射率使用阿贝折射仪测量。
3:实验设备与材料清单:
设备包括分光光度计(安捷伦Cary 60)、DLS仪器(马尔文帕纳科Zetasizer Nano C)、迷你挤出器(Avanti极地脂质)、试管旋转器(赛默飞世尔Labquake)、轨道摇床(基因马特BioExpress)及紫外比色皿(BRAND公司)。材料包含脂肪酸、氢氧化钠、双甘氨肽、POPC、氯仿、葡萄糖、蔗糖、腺苷5'-单磷酸和RNA。
4:0)、DLS仪器(马尔文帕纳科Zetasizer Nano C)、迷你挤出器(Avanti极地脂质)、试管旋转器(赛默飞世尔Labquake)、轨道摇床(基因马特BioExpress)及紫外比色皿(BRAND公司)。材料包含脂肪酸、氢氧化钠、双甘氨肽、POPC、氯仿、葡萄糖、蔗糖、腺苷5'-单磷酸和RNA。 实验流程与操作步骤:
4. 实验流程与操作步骤:通过混合胶束溶液与缓冲液、涡旋振荡制备囊泡。以缓冲液为空白在分光光度计上测定浊度,采用DLS测量粒径并测定折射率。部分样本通过聚碳酸酯滤膜挤出控制尺寸与层数。
5:数据分析方法:
使用HoloPy计算散射截面并推导浊度值,膜厚度数据拟合采用列文伯格-马夸尔特算法,辐射传输计算整合了爱丁顿近似法。
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Measures turbidity and absorbance of vesicle samples by detecting light transmission.
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