研究目的
设计、合成并评估基于长荧光寿命氮杂氧三烯铵染料(ADOTA和DAOTA)且带有酚基取代基的荧光PET pH探针,研究其光学特性、pH响应性及开关比,以探索其作为潜在传感器的应用。
研究成果
DAOTA发色团结合酚羟基取代基(尤其是对位取代)可提供高开关比(最高达550倍)及高效的pH响应性荧光猝灭,使其在传感器应用中颇具前景。酚羟基的位置会影响PET效率与pKa值,其中静电相互作用主导pKa变化,而共振效应则影响PET速率。
研究不足
ADOTA发色团在开启态表现出显著的荧光猝灭,使其不太适合作为PET探针。关闭态中的残余荧光可能源于杂质,且PET速率估算对微量荧光杂质的误差较为敏感。缓冲液的盐效应可能导致轻微的动态猝灭,且本研究仅限于水溶液体系,未在复杂基质中进行广泛测试。
1:实验设计与方法选择:
本研究合成了一系列苯酚取代的ADOTA和DAOTA染料,通过吸收和发射光谱表征其光物理性质,以评估PET淬灭导致的pH依赖性荧光行为。
2:样本选择与数据来源:
化合物由三-(2,6-二甲氧基苯基)碳鎓四氟硼酸盐与各种茴香胺异构体合成,纯化后溶解于不同pH值的PBS缓冲液(含1%体积比DMSO)中进行测量。
3:实验设备与材料清单:
仪器包括用于吸收光谱的Perkin-Elmer Lambda 1050紫外/可见/近红外分光光度计、配备混合PMT检测器的FluoroTime 300系统(PicoQuant)用于荧光光谱和寿命测定、500 MHz和300 MHz核磁共振仪、MALDI-TOF及FT-ICR质谱仪以及元素分析设备?;约凉鹤陨桃倒┯ι?。
4:实验流程与操作步骤:
合成反应在盐酸吡啶或甲胺中进行,通过色谱法或重结晶纯化。光谱测量在控制pH值的比色皿中进行,时间分辨荧光激发波长为510 nm,量子产率以罗丹明6G为参照测定。
5:数据分析方法:
使用FluoFit软件对荧光衰减进行指数函数拟合,pH响应采用S型曲线拟合,PET速率通过开关比和寿命估算得出。
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UV/vis/NIR spectrometer
Lambda 1050
Perkin-Elmer
Recording absorption spectra of compounds in solution.
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Fluorescence lifetime system
FluoroTime 300
PicoQuant
Measuring fluorescence spectra and lifetimes with time-resolved detection.
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NMR spectrometer
500 MHz
Acquiring 1H and 13C NMR spectra for compound characterization.
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MALDI-TOF mass spectrometer
Recording mass spectra using dithranol matrix for compound identification.
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FT-ICR mass spectrometer
ESP-MALDI-FT-ICR
Acquiring high-resolution mass spectra with 7 Tesla magnet.
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pH meter
Measuring and adjusting pH of buffer solutions.
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MilliQ apparatus
Purifying water for use in solutions.
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Ludox
Used as a scattering suspension for measuring instrument response function in fluorescence lifetime measurements.
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Rhodamine 6G
Used as a reference standard for fluorescence quantum yield measurements.
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