研究目的
开发一种线粒体靶向的近红外荧光探针，用于活细胞和体内对二氧化硫衍生物（HSO3?/SO32?）进行比色和比率检测。
研究成果
所开发的线粒体靶向近红外荧光探针1能够对SO2衍生物进行快速、灵敏且选择性的比率检测，其检测限低至1.22微摩尔。该探针成功实现了活体BT-474细胞和斑马鱼中内源性与外源性SO2衍生物的成像，显示出其在生物与环境应用中的潜力。
研究不足
该探针的缓冲体系（10% v/v）需使用DMF，这可能并非适用于所有生物应用场景。检测虽特异性针对HSO3?/SO32?，但在未充分测试的复杂生物基质中可能存在干扰。本研究仅限于BT-474细胞和斑马鱼模型，对其他细胞类型或体内模型的适用性尚未验证。
1：实验设计与方法选择：
基于共轭杂化香豆素-半花菁化合物设计探针，利用1,4-加成反应机制选择性检测HSO3?/SO32?。采用荧光与紫外-可见光谱进行光谱分析，共聚焦显微镜用于细胞和斑马鱼成像。
2：样本选择与数据来源：
以BT-474人乳腺癌细胞和3日龄斑马鱼为生物样本，测试阴离子与生物硫醇的选择性。
3：实验设备与材料清单：
荧光分光光度计（安捷伦Cary Eclipse）、紫外-可见分光光度计（安捷伦Cary 60）、核磁共振仪（布鲁克AVANCE Ⅲ 600 MHz）、质谱仪（布鲁克ApexUltra 7.0 T）、共聚焦显微镜（蔡司LSM 880）、HEPES缓冲液、DMF、多种阴离子、生物硫醇、线粒体绿染料、RPMI 1640培养基、胎牛血清、E3胚胎培养液。
4：0）、核磁共振仪（布鲁克AVANCE Ⅲ 600 MHz）、质谱仪（布鲁克ApexUltra 0 T）、共聚焦显微镜（蔡司LSM 880）、HEPES缓冲液、DMF、多种阴离子、生物硫醇、线粒体绿染料、RPMI 1640培养基、胎牛血清、E3胚胎培养液。 实验流程与操作步骤：
4. 实验流程与操作步骤：通过化合物3与2,3-二甲基苯并[d]噻唑-3-碘鎓盐反应合成探针1；在HEPES缓冲液中用HSO3?进行光谱滴定；细胞培养并与探针及分析物孵育；斑马鱼处理与成像；与线粒体绿染料共定位研究。
5：数据分析方法：
采用荧光强度比值（I490/I749）进行比率检测；根据信噪比（S/N=3）计算检测限；皮尔逊相关系数用于共定位分析；MTT法测定细胞毒性。
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