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一种用于检测人血清中α-L-岩藻糖苷酶活性的灵敏聚合物点荧光传感器
摘要： α-L-岩藻糖苷酶（AFu）是肝细胞癌和岩藻糖贮积症早期诊断的重要生物标志物。本研究首次开发了一种基于内滤效应的新型、灵敏且选择性聚合物点（PDs）荧光传感策略用于AFu活性测定。通过温和的一锅法合成了量子产率高达53.6%的PDs。该策略的检测机制基于PDs与对硝基苯酚（PNP）之间的内滤效应——PNP是AFu催化4-硝基苯基-α-L-岩藻吡喃糖苷（PNPF）水解的产物。PNP的吸收峰与PDs的荧光激发光谱重叠，导致PDs荧光猝灭或减弱。该传感体系在0.01-0.9 U L-1范围内呈现良好线性关系，AFu检测限低至0.001 U L-1（信噪比S/N=3）。该PDs传感器成功应用于人血清样本中AFu的测定。
关键词： 人血清、α-L-岩藻糖苷酶、聚合物点、内滤效应、荧光传感器
更新于2025-11-19 16:46:39
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通过RNA适配体电极对未稀释人血清和血液中的多巴胺进行结合与分析
摘要： 通过适配体电极对生物流体中多巴胺等神经递质进行特异性分析时，介质的非特异性吸附会产生不利影响，这种效应在电极表面带正电荷（多巴胺在此处发生氧化）时尤为显著。我们发现，在未稀释的人血清和血液中，由于血清及血液成分的非特异性界面吸附，RNA适配体/半胱胺修饰电极的多巴胺检测受到强烈抑制。研究表明：当采用流动注射分析模式，并在磷酸盐缓冲液（PBS）载体中进行血清样品进样后的清洗步骤时，可最大限度减少血清蛋白（但非血液成分）的非特异性吸附。在此条件下，全人血清中多巴胺-适配体结合亲和力(1.9±0.3)×10? M?1s?1与PBS体系中的(3.7±0.3)×10? M?1s?1相当，且多巴胺氧化信号与浓度呈线性关系，检测灵敏度达73±3 nA·μM?1·cm?2，最低检测限为114±8 nM。该流动注射适配体电极系统可直接分析未稀释人血清样本中的基础多巴胺水平，无需使用任何物理分隔膜或过滤程序。结果表明该策略能有效应对正电极电位下最显著发生的生物表面污染问题，有助于设计更高效的生物医学抗污方案。
关键词： 人血清、血液、表面污染、RNA适配体电极、多巴胺、计时电流法、电化学阻抗、流通池
更新于2025-09-23 15:22:29
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基于两种CdSe/ZnS量子点纳米珠和磁珠的荧光免疫分析法同时测定肿瘤标志物癌胚抗原和细胞角蛋白19片段
摘要： 本文描述了一种同时测定癌胚抗原（CEA）和细胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）的方法。采用发射峰分别为530 nm（绿色）和585 nm（黄色）的两种CdSe/ZnS量子点纳米珠（QBs）作为标记物，以磁性微珠（MBs）进行分离。将MBs作为基底偶联CEA和CYFRA21-1抗体用于蛋白质分离，随后分别将不同颜色的QBs与抗CEA和抗CYFRA21-1抗体连接。免疫复合物形成后，在相同激发波长340 nm下测定绿色和黄色发射强度。CEA的检测限为0.1 ng·mL?1，CYFRA21-1为0.2 ng·mL?1。加标血清的回收率：CEA为92.1-118.1%，CYFRA21-1为90.8-115.2%，相对标准偏差分别为6.3-12.3%和7.1-11.8%。该方法成功应用于45份人血清样本中两种蛋白的同时测定，结果与化学发光酶免疫分析试剂盒测定值高度相关。
关键词： 肺癌，人血清，荧光，多重检测，抗体
更新于2025-09-23 15:19:57
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用于HIV药物检测的生物相容性碲化钯量子点放大生物传感器
摘要： 茚地那韦（IDV）是一种强效且耐受性良好的蛋白酶抑制剂类抗逆转录病毒（ARV）药物，作为人类免疫缺陷病毒（HIV）高效抗逆转录病毒治疗（HAART）的组成部分使用。该药物经肝脏首过代谢，此过程由微粒体细胞色素P450-3A4酶（CYP3A4）催化，可能导致有利或不良的药代动力学特征。因此在HIV治疗期间对IDV进行治疗药物监测（TDM）至关重要，既能预防其首过代谢的不良反应，又能优化个体化给药方案。生物传感器因其高灵敏度和实时响应特性，现已成为即时检测（POCT）中TDM评估的首选诊断工具。 本研究通过硫醇和碳二亚胺共价键合化学技术，将CYP3A4（硫醇盐酶）与巯基乙酸包被的碲化钯量子点（TGA-PdTeQD）薄膜沉积于半胱胺功能化金盘电极（Cyst|Au）表面，制备了IDV电化学生物传感器。通过500 mV/s扫描速率下的循环伏安法（CV）测定该生物传感器（CYP3A4|TGA-PdTeQD|Cyst|Au）的电化学特征，并记录特征还原峰电位值-0.26 V处的传感器响应。该茚地那韦生物传感器的灵敏度、线性范围（LR）和检测限（LOD）分别为4.45±0.11 μA nM?1 IDV、0.5-1.0 nM IDV（即3.6×10??-7.1×10?? mg/L IDV）和4.5×10?? mg/L IDV。其两个分析参数（LR和LOD）值比茚地那韦最大血浆浓度（Cmax）值（0.13-8.6 mg/L IDV）低达四个数量级。 该IDV生物传感器成功用于检测含溶解茚地那韦片剂的人血清样本，证实其适用于治疗药物监测应用——可在服药后1-2小时内获取的即时检测样本中检测极低药物浓度。
关键词： 人血清、检测限、茚地那韦、碲化钯量子点、循环伏安法、电化学传感器、细胞色素P450-3A4
更新于2025-09-16 10:30:52
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利用从人血清中分离的抗脂多糖抗体对大肠杆菌进行荧光免疫分析
摘要： 本研究中，采用革兰氏阴性菌大肠杆菌BL21(DE3)菌株（其外膜含有脂多糖LPS）及其改良型ClearColi?菌株（不含LPS），通过以下步骤从人血清中分离抗LPS抗体：(1) 血清蛋白与BL21(DE3)结合；(2) 用酸解离BL21(DE3)上结合的蛋白（包括抗LPS抗体）；(3) 利用ClearColi过滤解离蛋白以去除杂蛋白；(4) 通过蛋白A柱层析分离抗体组分。采用荧光激活细胞分选法分析分离抗体的结合特性，证实其能选择性结合BL21(DE3)外膜上的LPS，并通过热泳免疫分析法测定其解离常数。将抗体固定于修饰微孔板表面后，通过荧光检测BL21(DE3)验证了分离抗LPS抗体的体外适用性。将抗LPS抗体固定于金电极后，也实现了对BL21(DE3)的电化学检测。
关键词： 分离，抗LPS抗体，LPS，ClearColi，人血清
更新于2025-09-10 09:29:36