研究目的
开发一种灵敏且选择性强的荧光传感器，用于测定人血清中α-L-岩藻糖苷酶活性——该酶是肝细胞癌和岩藻糖苷贮积症等疾病的生物标志物。
研究成果
基于PDs的荧光传感器对AFu检测具有高灵敏度和选择性，检测限低至0.001 U L-1。该传感器成功应用于人血清样本检测，回收率良好且相对标准偏差低，展现出临床诊断潜力。本研究为AFu活性测定提供了新型无毒高效方法，并拓展了PDs在生物传感领域的应用。
研究不足
该方法可能受复杂生物样本中潜在干扰因素的限制，尽管选择性测试显示其性能良好。优化pH值、温度和反应时间等条件是必要的，且量子点的合成需要特定的纯化步骤。该方法对其他样本类型的适用性或体内应用尚未进行广泛探索。
1：实验设计与方法选择：
本研究基于内滤效应（IFE）原理，采用1,4-苯醌与乙二胺合成的聚合物点（PDs）构建荧光传感策略。其机制为AFu水解PNPF生成PNP，PNP的吸收光谱与PDs的激发光谱重叠导致荧光猝灭。
2：样本选择与数据来源：
在缓冲液中配制不同浓度（0至1000 U L-1）的AFu溶液。人血清样本经稀释后添加AFu进行分析。
3：实验设备与材料清单：
材料包括Sigma-Aldrich的AFu、TCI的PNPF、硫酸奎宁、BSA、酶类、氨基酸、金属离子，以及国药集团化学试剂有限公司的乙二胺、1,4-苯醌、PNP、柠檬酸、磷酸氢二钠等盐类。设备包含岛津RF-6000荧光分光光度计、岛津UV-2450紫外可见分光光度计、尼高力Avatar 330傅里叶变换红外光谱仪、FEI Tecnai F20透射电镜、Kratos AXIS-ULTRA DLD-600W X射线光电子能谱仪、布鲁克D8 Advance X射线衍射仪、爱丁堡FL920荧光分光光度计及密理博Milli-Q纯水系统。
4：实验流程与操作步骤：
PDs通过乙二胺和1,4-苯醌混合物70°C加热3小时合成后纯化。AFu活性测定采用37°C孵育AFu与PNPF 20分钟，随后加入PDs溶液并在410 nm激发波长下检测荧光。选择性测试使用干扰物质验证。血清样本经稀释后按相同流程分析。
5：数据分析方法：
测量荧光强度并建立校准曲线。根据信噪比S/N=3计算检测限。血清样本统计分析包含回收率与相对标准偏差（RSD）计算。
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