- 标题
- 摘要
- 关键词
- 实验方案
- 产品
-
福尔马林固定石蜡包埋样本中肽类物质的MALDI-MSI技术:位点间重现性与空间分辨率
摘要: 目的 为推动基质辅助激光解吸电离质谱成像(MALDI-MSI)从基础研究向临床应用过渡,需对福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)组织进行分析。本研究旨在优化FFPE样本的MALDI-MSI原位胰蛋白酶消化流程,并验证不同取样部位能否获得可重复的相似结果。 实验设计 对小鼠肠道、人卵巢畸胎瘤及来自三个不同部位的肿瘤实体组织微阵列等FFPE组织进行MALDI-MSI制备。采用自动化喷雾装置将胰蛋白酶包被于样本表面,通过潮解作用维持稳定湿润环境进行孵育。消化后使用相同喷雾设备喷涂α-氰基-4-羟基肉桂酸(CHCA),并在50μm空间分辨率下通过rapifleX MALDI Tissuetyper质谱仪分析。数据采用flexImaging、SCiLS和R软件处理。 结果 胰蛋白酶应用与消化过程是导致FFPE样本MALDI-MSI空间分辨率下降及变异的主要因素。通过本工作流程可区分不同组织中的离散组织学特征,且经空间分割与主成分分析评估,不同取样部位生成的图像质量具有相似性。 结论与临床意义 遵循标准化MALDI-MSI工作流程可保持空间分辨率及跨部位重现性。
关键词: 可重复性、组织分型、基质辅助激光解吸电离、工作流程、福尔马林固定石蜡包埋组织
更新于2025-09-23 15:21:21
-
一种通过间接基质辅助激光解吸/电离质谱法对根-土界面进行广泛分子成像的方法
摘要: 理解根际过程受限于在根-土连续体相关空间尺度内对复杂分子转化进行成像的需求。本研究展示了一种分析方法:先将根际有机化合物提取到PVDF膜上并保持其二维分布,再通过基质辅助激光解吸/电离质谱(MALDI-MS)成像化合物分布。该方法使我们能可视化并鉴定根表及根际假定根系分泌物中的化合物。在柳枝稷根际1.8厘米×0.6厘米的采样区域内,我们观察到至少四个化学性质不同的区域。利用高性能傅里叶变换离子回旋共振质谱,我们准确标注了这些区域共定位的众多分子。
关键词: 化学成像、聚偏氟乙烯膜、空间代谢组学、基质辅助激光解吸电离、根际、液相色谱
更新于2025-09-23 15:21:01
-
质谱成像(MALDI MS)的采集速率超过每秒100像素
摘要: 基质辅助激光解吸/电离(MALDI)飞行时间(TOF)质谱(MS)技术在生物组织分子成像中的应用实用性受限于分析速度。通常认为XY载物台的间歇式微动扫描速度较慢是导致新鲜样品材料无法快速供应至激光光斑的关键因素。我们实验室自主研发的高通量成像TOF质谱仪通过采用基于检流计的光学扫描器实现靶板上激光光斑的快速重定位,显著提升了样品扫描速率。该MALDI TOF质谱仪离子源集成的光学系统能通过改良栅格将激光束聚焦为10微米圆形光斑,从而以超过100像素/秒的采集速率获取具有明确像素尺寸的高分辨率质谱图像。本文探讨了关键参数对总质谱成像时间的影响。应用这种新型扫描技术展示了抗肿瘤药物在三维结肠腺癌细胞聚集体中的分布情况:包含100×100像素(横向分辨率10微米)的单幅质谱图像可在约70秒内完成采集。
关键词: MSI(质谱成像)、TOF(飞行时间)、质谱成像、高通量、激光束扫描、结直肠腺癌、三维细胞聚集体、球状体、网格离子源、MALDI(基质辅助激光解吸电离)
更新于2025-09-23 15:21:01
-
激光质谱法
摘要: 质谱技术(MS)已广泛应用于化学、生物化学、制药及环境等领域。激光在质谱中有多种用途,如激光解吸(LD)、激光解吸电离(LDI)、基质辅助激光解吸电离(MALDI)和多光子电离(MPI)。本文介绍了激光束质谱技术的最新进展与应用,包括激光烧蚀电感耦合等离子体质谱(LA-ICP-MS)。
关键词: 激光解吸、基质辅助激光解吸电离、多光子电离、激光磨蚀、激光解吸/电离
更新于2025-09-23 15:19:57
-
基质辅助激光解吸/电离质谱成像技术在鱼片品质评价中的应用
摘要: 全球鱼类消费量正在迅速增长。由于鱼类在冷冻储存过程中会发生物理和化学变化,评估鱼片质量至关重要。鱼片会因氧化三甲胺分解而产生甲醛(FA)积累。甲醛是一种强效的蛋白质变性剂,因此在鱼类加工过程中避免甲醛积聚对保持鱼类品质(尤其是质地)非常重要。为确定甲醛积累位置以维持鱼片质量,我们采用基质辅助激光解吸/电离质谱成像技术,旨在识别反映变性及/或聚集等状况的肌肉源性肽段。我们使用经亲脂性分子清洗的冷冻切片,检测到多种肽段峰。此外,我们还尝试通过蛋白酶处理确定表征鱼片软化的指标。我们检测到了由甲醛和蛋白酶处理产生的特征峰,这些发现与显示鱼片实际坚实度的质地剖面结果一致。这些分子因此可作为评估鱼片质量的有效标志物。
关键词: 质谱成像、肽、基质辅助激光解吸电离、蛋白酶、甲醛
更新于2025-09-23 15:19:57
-
通过基质辅助激光解吸/电离-质谱成像技术在猪排组织中观察到的二酰基、烷基酰基和烯基?;字5钪掷嗟亩捞胤植?
摘要: 磷脂酰胆碱(PC)是肉类中的主要磷脂,影响肉品品质(如健康性)。根据sn-1位键合类型,PC可分为三类:二酰基、烷基?;拖┗;?。为探究其在猪组织(包括背最长肌与腰大肌、里脊肌、肌间脂肪及透明组织)中的组成与分布,我们采用基质辅助激光解吸电离-质谱成像技术(MALDI-MSI)进行分析。通过液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)鉴定出11种二酰基PC、7种烷基?;鵓C和6种烯基酰基PC。尽管许多烷基酰基和烯基?;鵓C具有相同质荷比(m/z),我们仍能通过MALDI-MSI实现可视化。二?;⑼榛;?或烯基酰基PC在组织中呈现独特分布模式,表明其分布与脂肪酸组成相关。PC是肉类中胆碱的主要膳食来源,且肌肉组织中含量显著更高。胆碱摄入可延缓年龄相关的记忆衰退和神经退行性疾病,因此食用猪肌肉组织可能有助于预防这些疾病。本研究支持采用MALDI-MSI分析评估PC种类与肉品品质参数的关联。
关键词: 质谱成像(MSI)、脂质分布、磷脂酰胆碱、液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)、猪肉、基质辅助激光解吸电离(MALDI)
更新于2025-09-23 15:19:57
-
采用大气压基质辅助激光解吸电离质谱技术对暴露于氟虫腈的斑马鱼进行磷脂成像
摘要: 质谱成像技术能有效检测并反映分子空间分布信息,已广泛应用于生物体内源或外源分子的原位分析。本研究采用大气压基质辅助激光解吸电离质谱(AP-MALDI-MS)对氟虫腈暴露的全斑马鱼切片进行成像分析。m/z 600-950范围内的化学指纹图谱显示,氟虫腈暴露组与未处理组斑马鱼的磷脂存在显著差异。主要受影响的磷脂被鉴定为PC(34:2)、PC(34:1)、PC(34:2)+Na、PC(36:4)、PC(38:6)以及PS(18:0/22:6)、PI(18:0/20:4)、PI(18:1/20:4)等。结果表明氟虫腈暴露显著影响斑马鱼(尤其是眼部区域)的磷脂代谢。本研究为农药动物毒理学研究及相关代谢分析提供了新方法或可能性。
关键词: 氟虫腈,在体磷脂,质谱成像,基质辅助激光解吸电离,斑马鱼
更新于2025-09-19 17:13:59
-
解吸离子和中性粒子的温度依赖性及基质辅助激光解吸/电离的电离机制
摘要: 为研究基质2,5-二羟基苯甲酸(2,5-DHB)的紫外基质辅助激光解吸电离(UV-MALDI)电离机制,开展了两项温度依赖性实验。首先利用旋转四极杆质谱仪测量了355纳米紫外激光脉冲辐照下2,5-DHB固体样品解吸中性粒子的角分辨强度与速度分布;其次通过四极杆质谱仪同步检测每次激光脉冲作用下垂直于表面方向解吸的中性粒子与离子。两项实验均在100K和300K初始温度下进行,据此计算离子-中性粒子比的初始温度依赖性。测量结果与热模型预测的离子-中性粒子比温度依赖性高度吻合,表明热诱导质子转移是UV-MALDI中产生2,5-DHB初始离子的主导反应。
关键词: 温度依赖性、解吸中性粒子、基质辅助激光解吸电离(MALDI)、电离机制、热模型、解吸离子、离子与中性粒子比率、2,5-二羟基苯甲酸(2,5-DHB)
更新于2025-09-19 17:13:59
-
一种结合薄层色谱与基质辅助激光解吸电离质谱,并辅以色谱后衍生化的伯胺分析方法
摘要: 建议采用原位衍生化方法对含伯胺化合物进行修饰,以便通过薄层色谱与基质辅助激光解吸电离质谱联用技术进行分析。该方案基于使用三(2,6-二甲氧基苯基)甲基鎓试剂对薄层色谱板上分离后的分析物进行色谱区内的后处理。这些带有永久正电荷的衍生物,在直接从薄层板记录的质谱图中显示出其阳离子部分异常强烈的峰信号及高信噪比。该方法已在一系列脂肪族、芳香族及含胺药物上进行了测试。
关键词: 薄层色谱法、质谱法、伯胺、基质辅助激光解吸电离、衍生化
更新于2025-09-19 17:13:59
-
利用液相常压基质辅助激光解吸/电离质谱法通过脂质谱分析进行细菌鉴定
摘要: 背景:近年来,质谱技术(MS)被应用于临床微生物分型,利用基质辅助激光解吸电离(MALDI)快速记录微生物特异性质谱图谱的优势。最新研究表明,液相常压(AP)MALDI技术能从均质样本中产生极其稳定的离子流,并为较大生物分子生成类似电喷雾电离(ESI)的多电荷离子,同时保留了传统MALDI技术的诸多优势——包括高污染物耐受性、低样本消耗量和快速分析能力。本研究通过探索液相AP-MALDI MS的这些及其他优势,评估其在微生物分型中的应用潜力。 方法:采用液相AP-MALDI MS分析了遗传多样性细菌菌株,包括大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和肺炎克雷伯菌等临床相关菌种。细菌培养物经乙醇与甲酸的简易快速提取流程处理后,使用液态支撑基质(LSM)点样,并通过搭载自主搭建AP-MALDI离子源的Synapt G2-Si质谱仪进行分析。 结果:各菌种在400-1100 m/z范围内呈现独特的脂质图谱,可实现菌种鉴别。传统(固体)MALDI MS产生的谱图中包含大量基质相关簇峰且缺乏脂质峰。通过主成分分析(PCA)发现,测试菌种的质谱图形成明显聚类,基于PCA构建的预测模型分类准确率达98.63%。 结论:基于其独特脂质图谱,液相AP-MALDI MS图谱足以区分临床相关病原菌与其他细菌。
关键词: 基质辅助激光解吸电离、质谱、细菌、分析、物种鉴定、MALDI、生物分型、脂质
更新于2025-09-16 10:30:52