研究目的
通过成像根土连续体中相关空间尺度上的复杂分子转化来理解根际过程。
研究成果
研究结果表明,该方法能够阐明根际系统中多类有机化合物的空间分布特征。该技术为突破整体组学分析的局限提供了途径,有助于在亚毫米尺度上深入理解根际过程。
研究不足
当前通过质谱成像技术(MSI)原位检测某些分子存在局限性,这体现在印迹膜的表面化学性质与负离子化模式分析不兼容——而负离子化模式通常更适用于检测糖类和有机酸。
1:实验设计与方法选择:
该方法通过将根际有机化合物提取到PVDF膜上并保持其二维分布,随后利用MALDI-MS成像技术分析化学物质的分布情况。
2:样本选择与数据来源:
在美国密歇根州凯洛格生物站的土壤中,将柳枝稷种植于带有可拆卸侧板的根盒内。
3:实验设备与材料清单:
高密度聚乙烯根盒、PVDF膜、MALDI靶板、双面铜胶带、MALDI基质(2,5-二羟基苯甲酸)、15特斯拉傅里叶变换离子回旋共振质谱仪(FTICR-MS)。
4:实验步骤与操作流程:
植物生长8周后,移除根盒的侧板,在土壤/根系界面处贴附预润湿的PVDF膜48小时。随后将膜固定于MALDI靶板上并施加基质,采用正离子模式进行质谱成像分析。
5:数据分析方法:
15T-FTICR-MS的超高质量分辨率实现了对PVDF膜上解吸离子精确分子式的标注,结合正交液相色谱-质谱分析辅助完成可靠分子鉴定。
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MALDI target plate
384-well
Bruker Daltonics
Mounting the PVDF membrane for MALDI-MS analysis
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Fourier transform ion cyclotron resonance (FTICR)-MS
SolariX
Bruker Daltonics
Performing MALDI-MS imaging
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PVDF membrane
Extracting organic compounds from the rhizosphere while maintaining their 2D distribution
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TM-Sprayer
HTX Technologies
Applying MALDI matrix to the PVDF membrane
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SmartBeam II laser source
Bruker Daltonics
Ablating ions from the PVDF membrane for MSI
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