研究目的
采用AP-MALDI-MS成像技术研究氟虫腈暴露对斑马鱼磷脂代谢的影响。
研究成果
AP-MALDI-MSI技术有效观测到氟虫腈暴露诱导斑马鱼体内代谢物分布的变化,为农药毒理学研究及动物体内代谢分析提供了新方法。
研究不足
该研究聚焦于氟虫腈暴露对斑马鱼磷脂代谢的即时影响,未涉及长期暴露效应或详细的机制解析。
1:实验设计与方法选择
本研究采用大气压基质辅助激光解吸电离质谱成像技术(AP-MALDI-MS)对氟虫腈暴露的斑马鱼全切片进行成像分析,以探究磷脂代谢变化。
2:样本选择与数据来源
成年AB品系斑马鱼经100 μg/L氟虫腈水溶液暴露12小时后实施安乐死并冷冻切片。
3:实验设备与材料清单
SHIMADZU iMScope TRIO质谱成像系统、冷冻切片机(Leica CM1950)、多种MALDI基质(CHCA、DHB、NEDC、DAN)及溶剂(甲醇、乙腈)。
4:实验流程与操作步骤
将斑马鱼组织切成10 μm厚切片,固定于ITO载玻片并储存于-80℃。使用自制装置施加基质,通过优化激光功率与光斑直径的AP-MALDI-MS进行分析。
5:数据分析方法
采用Imaging MS solution Ver.1.30软件处理质谱数据,手动划定感兴趣区域(ROI)比较暴露组与对照组的差异。
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SHIMADZU iMScope TRIO
iMScope TRIO
SHIMADZU
Mass spectrometry imaging
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Leica CM1950
CM1950
Leica Biosystems Nussloch GmbH
Freezing-microtome
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α-cyano-4-hydroxycinnamic acid
CHCA
Sigma-Aldrich
MALDI matrix
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2,5-dihydroxybenzoic acid
DHB
Sigma-Aldrich
MALDI matrix
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N-(1-naphthyl) ethylenediamine dihydrochloride
NEDC
Sigma-Aldrich
MALDI matrix
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1,5-diaminonapthalene
DAN
Sigma-Aldrich
MALDI matrix
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