研究目的
开发一种LCM协议，从新鲜冷冻的小鼠骨骼中获取高质量RNA用于基因表达分析。
研究成果
开发的LCM方案成功从新鲜冷冻的小鼠骨骼中获取了足量高质量RNA，适用于基因表达分析。该方案可适配于研究各种条件下任何硬组织细胞中的原位基因表达。
研究不足
该方案特别针对采用重力收集样本的LCM系统进行了优化，若不做调整可能无法直接适用于其他LCM系统。
1：实验设计与方法选择：
本研究评估了染色方案、冰冻切片厚度、显微切割组织量、RNA提取试剂盒及激光捕获显微切割系统对RNA得率与完整性的影响。
2：样本选择与数据来源：
使用3月龄雄性野生型C57BL/6小鼠的骨组织。
3：实验设备与材料清单：
包含粘附载玻片、商用LCM冰冻切片染色剂、PET膜、激光捕获显微切割系统及基于柱式的RNA提取试剂盒。
4：实验流程与操作步骤：
包括冷冻包埋、切片制备、快速染色方案、激光捕获显微切割、RNA提取及RNA得率与完整性测定。
5：数据分析方法：
采用微毛细管电泳法测量RNA得率与完整性。
独家科研数据包，助您复现前沿成果，加速创新突破
获取完整内容-
LCM frozen section stain
Staining of frozen sections for laser capture microdissection
-
PET membrane
Used to sandwich the sample between the membrane and the adhesive film during LCM
-
LCM system
Used for laser capture microdissection of bone cells
-
RNA extraction kit
Used for extracting RNA from microdissected cells
-
登录查看剩余2件设备及参数对照表
查看全部
