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生成iPSC来源的脉络膜内皮细胞以研究年龄相关性黄斑变性

DOI：10.1167/iovs.15-17073 期刊：Investigative Opthalmology & Visual Science 出版年份：2015 更新时间：2025-09-23 15:21:01
摘要： 目的：年龄相关性黄斑变性（AMD）是西方世界导致不可逆失明的最常见原因，其特征为脉络膜内皮细胞（CECs）、视网膜色素上皮细胞（RPE）和光感受器细胞功能失调并最终死亡。目前基于干细胞的治疗策略——旨在替换光感受器和RPE细胞——是主要科研焦点。但这些方法的成效可能还需替换其下层起支撑作用的脉络膜血管系统。本研究旨在生成干细胞来源的CECs以开发高效分化与移植方案。 方法：从Tie2-GFP小鼠分离皮肤成纤维细胞，通过转录因子Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc的病毒转导重编程为两条独立的诱导多能干细胞（iPSC）系。采用与RF6A CEC细胞系或原代小鼠CECs共培养的方法，将Tie2-GFP iPSCs分化为CECs。通过RT-PCR和免疫细胞化学检测内皮细胞及CEC特异性标志物对诱导多能干细胞来源的CECs进行鉴定。 结果：在Tie2内皮细胞启动子调控下表达绿色荧光蛋白（GFP）的小鼠所生成的诱导多能干细胞呈现经典多能性标志物及干细胞形态。诱导多能干细胞来源的CECs表达碳酸酐酶IV、eNOS、FOXA2、PLVAP、CD31、CD34、ICAM-1、Tie2、TTR、VE-钙黏蛋白和vWF。 结论：诱导多能干细胞来源的CECs将成为模拟AMD中脉络膜毛细血管特异性损伤及未来脉络膜内皮细胞替代疗法的重要工具。
作者： Allison E. Songstad，Luke A. Wiley，Khahn Duong，Emily Kaalberg，Miles J. Flamme-Wiese，Cathryn M. Cranston，Megan J. Riker，Dana Levasseur，Edwin M. Stone，Robert F. Mullins，Budd A. Tucker
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研究概述 实验方案 设备清单

研究目的

生成干细胞来源的脉络膜内皮细胞（CECs），以开发高效的分化和移植方案，用于研究和治疗年龄相关性黄斑变性（AMD）。

研究成果

诱导多能干细胞衍生的脉络膜内皮细胞（CECs）表达脉络膜内皮细胞的关键标志物，可作为研究年龄相关性黄斑变性（AMD）和开发细胞替代疗法的有价值工具。该研究为未来脉络膜内皮细胞分化与移植治疗AMD奠定了基础。

研究不足

该研究使用小鼠模型进行，其发现可能无法直接适用于人类细胞。此外，未充分探究分化方案的效率以及iPSC来源的角膜内皮细胞（CECs）在体内的功能整合情况。

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