研究目的
研究Au(III)与BSA的结合过程，以及由此产生的构象变化诱导的BSA-Au(III)复合物红色荧光现象，并探究该红色荧光的起源。
研究成果
研究表明，BSA-Au(III)复合物中红色荧光的产生与pH诱导的BSA构象变化相关。实验确定了BSA中Au(III)的多个结合位点，包括天冬酰胺片段和Cys-34位点。研究强调了Cys-Cys二硫键对红色荧光产生的必要性。该方案可应用于研究其他蛋白质与金属阳离子的相互作用。
研究不足
该技术需要精确控制pH值和温度以避免蛋白质变性。红色荧光的出现过程缓慢，在室温下需要数天才能达到最大强度。过量金离子产生的高酸性会导致蛋白质变性。
1：实验设计与方法选择：
本研究采用光谱学和蛋白质化学技术分析BSA-Au(III)复合物。
2：样本选择与数据来源：
使用牛血清白蛋白(BSA)和三水合氯金酸(金(III)氯化物)。
3：实验设备与材料清单：
包括HPLC级水、BSA、氯金酸、氢氧化钠、二水合氯化铜、六水合氯化镍、N-乙基马来酰亚胺(NEM)、磷酸盐缓冲盐水(PBS)、尿素、碳酸氢铵(NH4HCO3)、三(2-羧乙基)膦(TCEP)。
4：3)、三(2-羧乙基)膦(TCEP)。 实验步骤与操作流程：
4. 实验步骤与操作流程：在受控pH和温度条件下合成BSA-Au(III)复合物、BSA-Cu(II)-Au(III)、BSA-Ni(II)-Au(III)、[Cys34封端-BSA]-Au(III)及[全硫醇封端-BSA]-Au(III)。
5：数据分析方法：
通过荧光光谱和激发-发射矩阵(EEM)分析结合位点及荧光模式。
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HPLC grade water
Used as a solvent in the synthesis of BSA-Au(III) complexes.
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gold (III) chloride trihydrate
Source of Au(III) for binding to BSA.
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copper (II) chloride dihydrate
Used to study competitive binding with Au(III) to BSA.
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nickel (II) chloride hexahydrate
Used to study competitive binding with Au(III) to BSA.
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N-ethylmaleimide (NEM)
Thiol capping agent used to modify cysteine residues in BSA.
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phosphate buffered saline (PBS)
Used as a buffer in the synthesis of [Cys34-capped-BSA]-Au(III).
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urea
Used in the preparation of [all-thiol-capped-BSA]-Au(III).
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ammonium bicarbonate (NH4HCO3)
Used in the preparation of [all-thiol-capped-BSA]-Au(III).
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tris(2-carboxyethyl)phosphine (TCEP)
Used to cleave disulfide bonds in BSA.
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