研究目的
研究一种新型亚氨基香豆素类红光至近红外荧光开启探针的开发和应用，用于活细胞和动物体内H2S的检测。
研究成果
该基于亚氨基香豆素的荧光探针对H2S表现出快速且显著的荧光开启信号变化，具有高选择性、高灵敏度、红光至近红外区长发射波长及大斯托克斯位移的特点。其细胞毒性低，可用于活细胞和动物体内H2S成像，是体外与体内实时检测和成像H2S的宝贵工具。
研究不足
由于H2S的pKa值，该探针在酸性条件（pH <6）下无效。该探针对线粒体和溶酶体的亚细胞定位特异性较差或无特异性。
1：实验设计与方法选择：
本研究合成了基于四氢喹喔啉亚胺香豆素的近红外荧光探针（NIR-IC-H2S）用于H2S检测。探针设计原理基于H2S介导的2,4-二硝基苯磺酰胺基团硫解反应。
2：样本选择与数据来源：
采用HeLa细胞和RAW264.7细胞进行细胞成像实验，以昆明小鼠作为活体检测动物模型。
3：7细胞进行细胞成像实验，以昆明小鼠作为活体检测动物模型。 实验仪器与材料清单：
3. 实验仪器与材料清单：Varian Mercury 600核磁共振波谱仪、Waters E2695液质联用系统及Bruker microTOF-Q质谱仪、Agilent Cary 100紫外-可见分光光度计、Agilent Cary Eclipse荧光分光光度计、倒置荧光显微镜（OLYPUS）用于细胞成像、Bruker In Vivo-Xtreme成像系统用于小鼠成像。
4：实验流程与操作步骤：
在HEPES缓冲液中测试探针对H2S的响应；细胞成像实验包括先用探针孵育细胞，再加入NaHS；活体成像实验包括先向小鼠注射探针，再注射NaHS。
5：数据分析方法：
监测652 nm处荧光强度变化，检测限采用3σ法测定。
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Bruker microTOF-Q instrument
microTOF-Q
Bruker
Acquiring mass spectra
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Agilent Cary 100 UV-Vis spectrophotometer
Cary 100
Agilent
Recording absorption spectra
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Agilent Cary Eclipse fluorescence spectrophotometer
Cary Eclipse
Agilent
Recording fluorescence measurements
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Bruker In Vivo-Xtreme imaging system
In Vivo-Xtreme
Bruker
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Varian Mercury 600 spectrometer
600
Varian
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Waters E2695 LC-MS system
E2695
Waters
Acquiring mass spectra
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Inverted fluorescence microscopy
OLYPUS
Taking cell images
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