研究目的
开发一种无创、无需标记的方法,利用荧光寿命成像显微镜(FLIM)和相量分析法对液滴中单细胞代谢进行表征,旨在根据细胞的代谢状态区分单个细胞。
研究成果
该研究提出了一种结合液滴微流控技术与荧光寿命成像显微技术(FLIM)的无创、无标记单细胞分析平台。该方法能基于代谢特征成功区分不同白血病细胞类型以及增殖与静止状态,在早期肿瘤和白血病筛查及个性化治疗中展现出应用前景。
研究不足
封装效率受泊松统计限制,单细胞封装效率与细胞双联体率之间存在权衡。该方法需要优化参数以最大化封装效率和FLIM性能。
1:实验设计与方法选择:
采用液滴微流控技术和FLIM相量分析法进行无创、无标记的单细胞分析。
2:样本选择与数据来源:
将白血病细胞系(K-562和Jurkat)及人包皮成纤维细胞封装于液滴中。
3:实验设备与材料清单:
PDMS材质的微流控芯片、Novec 7500混合Picosurf表面活性剂、蔡司LSM880多光子显微镜、钛宝石激光器及SimFCS软件。
4:实验流程与操作步骤:
细胞被封装于液滴内,在740纳米激发波长下采集FLIM数据,并对FLIM数据进行相量分析。
5:数据分析方法:
通过相量转换与距离分析量化代谢状态的差异。
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