研究目的
开发并表征能够靶向G-四链体DNA且具有光诱导电子转移特性的新型钌(II)配合物,以应用于潜在的光疗领域。
研究成果
钌(II)配合物1-4对G-四链体DNA表现出良好的亲和力与选择性,其中配合物1和3在U2OS细胞中经光照后显示出高光细胞毒性,可能通过I型或II型光反应机制实现,这表明其在无需端粒酶抑制的光疗法中具有应用前景。
研究不足
复合物4表现出较差的光物理性质;对映体未分离;进行了初步的生物学研究;光细胞毒性的机制尚未完全明确;研究仅限于体外实验。
1:实验设计与方法选择:
合成钌(II)配合物与TAP配体;光物理和电化学研究;利用发光、圆二色谱、生物层干涉技术和表面等离子共振研究DNA相互作用;分子对接与动力学模拟;细胞穿透及光细胞毒性测定。
2:样本选择与数据来源:
合成的寡核苷酸(wtTel23、富含GC的发夹结构)经纯化处理;骨肉瘤U2OS细胞用于生物学研究。
3:富含GC的发夹结构)经纯化处理;骨肉瘤U2OS细胞用于生物学研究。 实验设备与材料清单:
3. 实验设备与材料清单:核磁共振波谱仪(布鲁克AC-300 Avance II、布鲁克AM-500)、高分辨质谱仪(赛默飞世尔Q-提取轨道阱)、紫外-可见分光光度计(岛津UV-1700)、发光光谱仪(瓦里安Cary Eclipse、Jobin Yvon FluoroLog 3)、循环伏安仪(万通PGSTAT 100)、圆二色光谱仪(日本分光J-810)、生物层干涉传感器(Forte Bio SA传感器)、共聚焦显微镜(蔡司LSM 710)、LED光源(Prolumia 405 nm)。
4:0)、高分辨质谱仪(赛默飞世尔Q-提取轨道阱)、紫外-可见分光光度计(岛津UV-1700)、发光光谱仪(瓦里安Cary Eclipse、Jobin Yvon FluoroLog 3)、循环伏安仪(万通PGSTAT 100)、圆二色光谱仪(日本分光J-810)、生物层干涉传感器(Forte Bio SA传感器)、共聚焦显微镜(蔡司LSM 710)、LED光源(Prolumia 405 nm)。 实验流程与操作步骤:
4. 实验流程与操作步骤:在氩气?;は掠谝叶贾泻铣膳浜衔铮籇NA退火处理;滴定实验;生物层干涉与表面等离子共振测量;细胞培养与辐照;使用拟合软件进行数据分析。
5:数据分析方法:
发光猝灭的Stern-Volmer图;结合亲和力的McGhee-von Hippel拟合;熔解温度的Boltzmann拟合;生物层干涉与表面等离子共振的动力学分析;AutoDock分子对接与AMBER动力学模拟。
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