研究目的
设计并合成一种新型荧光传感器,用于高灵敏度和高选择性识别铜(II)离子,并将其应用于细胞成像。
研究成果
传感器CHT能高效识别Cu2+离子,具有高灵敏度、高选择性和快速响应特性。该传感器展现出低细胞毒性,并成功应用于活细胞中Cu2+离子的荧光成像,表明其在生物医学和环境监测领域具有应用潜力。
研究不足
该传感器在乙腈/磷酸盐缓冲液混合液中运行,可能无法完全模拟所有生物环境。除自来水外,未对复杂真实样品中的潜在干扰进行广泛测试。细胞毒性仅评估至20微摩尔浓度。
1:实验设计与方法选择:
通过7-(N,N-二乙氨基)香豆素-3-醛与2-肼基苯并噻唑的席夫碱反应合成了传感器CHT。采用1H NMR、13C NMR和ESI-MS对其结构进行表征,通过紫外-可见吸收光谱和荧光光谱研究其与Cu2+离子的相互作用。
2:样品选择与数据来源:
溶液配制于乙腈和PBS缓冲液(pH=7.4)中。测试的金属离子包括Mg2+、Zn2+、K+、Na+、Fe3+、Mn2+、Co2+、Ni2+、Ag+、Cd2+、Pb2+、Ca2+、Hg2+。所用细胞系为A549和MCF-7细胞。
3:4)中。测试的金属离子包括Mg2+、Zn2+、K+、Na+、Fe3+、Mn2+、Co2+、Ni2+、Ag+、Cd2+、Pb2+、Ca2+、Hg2+。所用细胞系为A549和MCF-7细胞。 实验设备与材料清单:
3. 实验设备与材料清单:设备包括紫外-可见分光光度计、荧光分光光度计、ESI-MS、共聚焦激光扫描显微镜、用于CCK8实验的酶标仪。材料包括香豆素衍生物、金属盐、乙腈、PBS缓冲液、细胞培养基(1640和DMEM)、胎牛血清。
4:实验步骤与操作流程:
CHT的合成、表征、与Cu2+离子的紫外-可见及荧光滴定、与其他金属离子的选择性测试、时间依赖性荧光实验、CCK8细胞毒性测定、共聚焦显微镜细胞成像。
5:数据分析方法:
监测荧光强度变化,在自来水中进行回收实验并进行统计分析(RSD),成像数据通过目视分析。
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获取完整内容-
confocal laser scanning microscope
Used for fluorescent imaging of cells to detect Cu2+ ions.
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enzyme marker
Used in CCK8 assay to determine cytotoxicity by measuring absorbance.
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ESI-MS
Used for mass spectrometry to characterize the sensor and its complex with Cu2+ ions.
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UV-vis spectrophotometer
Used to measure absorption spectra of the sensor and its interaction with Cu2+ ions.
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fluorescence spectrophotometer
Used to measure fluorescence emission spectra of the sensor and its quenching by Cu2+ ions.
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