研究目的
设计一种用于活细胞中快速、高灵敏度检测硫化氢的荧光探针。
研究成果
探针DHC是一种检测H2S的高效、快速且灵敏的荧光探针，具有低细胞毒性和良好的膜通透性，适用于生物成像应用。
研究不足
该探针在选择性区分高度相似的亲核试剂方面可能存在局限，且由于硫化钠具有危险性，使用时需谨慎。其在细胞外复杂生物环境中的应用尚未得到充分探索。
1：实验设计与方法选择：
基于α,β-不饱和乙酰香豆素荧光团设计探针DHC，通过迈克尔加成反应检测H2S。采用光谱学方法（荧光、紫外-可见、核磁共振、质谱）研究其作用机制与性能。
2：样本选择与数据来源：
化学试剂购自常规供应商。生物实验使用BHK细胞。
3：实验设备与材料清单：
JNM-ECS-400 MHz核磁共振仪、LQC质谱系统、日立F-4600荧光分光光度计、Lambda 35紫外-可见分光光度计、PXSJ-226 pH计、Bio-Rad 680型酶标仪，以及包括H2S供体Na2S在内的多种化学试剂。
4：实验步骤与操作流程：
通过多步反应合成探针DHC。在乙醇/水溶液中进行光学测定?？苟嘀址治鑫锏难≡裥杂刖赫圆馐浴＝蠬2S滴定实验?？故奔湟览敌杂庋芯?。研究pH效应。通过MTT法检测细胞毒性。利用BHK细胞进行成像实验。
5：数据分析方法：
采用线性回归计算检测限，对荧光与吸光度数据进行统计分析，细胞实验数据进行图像分析。
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Spectrofluorometer
HITACHI F-4600
HITACHI
Recording emission spectra
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NMR instrument
JNM-ECS-400 MHz
Measuring 1H and 13C NMR spectra
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Mass spectrometry system
LQC
Carrying out mass spectra
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UV-Vis spectrometer
Lambda 35
Executing absorbance spectra
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pH meter
PXSJ-226
Recording pH measurements
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Microplate reader
Bio-Rad model-680
Bio-Rad
Measuring absorbance values in MTT assays
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