研究目的
评估一种双标记抗PSCA半抗体用于免疫PET和荧光成像，以提高前列腺癌诊断和手术引导的准确性。
研究成果
双标记A11 cMb能特异性靶向PSCA阳性前列腺肿瘤，实现高对比度免疫PET与荧光成像。该探针在术前检测和术中导航方面展现出应用前景，有望通过临床转化改善前列腺癌治疗效果。
研究不足
该研究为临床前研究，使用小鼠模型，可能无法完全复现人类前列腺癌。局限性包括肿瘤血管生成和可及性可能存在差异，且需要在转移模型和临床环境中进行进一步验证。使用特定放射性核素（124I和89Zr）存在固有局限，如游离碘在胃和甲状腺中的蓄积，以及89Zr的骨摄取问题。
1：实验设计与方法选择：
本研究通过位点特异性偶联将A11 cMb与Cy5.5荧光团结合，并采用124I或89Zr进行放射性标记，用于前列腺癌模型的双模态成像。方法包括流式细胞术评估亲和力、微型PET/CT成像及荧光成像。
2：5荧光团结合，并采用124I或89Zr进行放射性标记，用于前列腺癌模型的双模态成像。方法包括流式细胞术评估亲和力、微型PET/CT成像及荧光成像。 样本选择与数据来源：
2. 样本选择与数据来源：使用人前列腺癌细胞系（22Rv1-PSCA、PC3-PSCA）在裸鼠中建立皮下和原位异种移植模型。数据采集自活体/离体成像及生物分布研究。
3：实验设备与材料清单：
设备包括微型PET/CT扫描仪（Inveon，西门子）、IVIS Lumina II成像系统（珀金埃尔默）、流式细胞仪（BD LSRFortessa X-20）、分光光度计（NanoDrop 2000）及伽马计数器（Wizard 3" 1480，珀金埃尔默）。材料包含A11 cMb蛋白、mal-Cy5.5（通用电气医疗集团）、p-SCN-Bn-DFO（大环化合物公司）、放射性核素（124I和89Zr来自3D Imaging LLC）及细胞培养试剂。
4：0）、分光光度计（NanoDrop 2000）及伽马计数器（Wizard 3" 1480，珀金埃尔默）。材料包含A11 cMb蛋白、mal-Cy5（通用电气医疗集团）、p-SCN-Bn-DFO（大环化合物公司）、放射性核素（124I和89Zr来自3D Imaging LLC）及细胞培养试剂。 实验流程与操作步骤：
4. 实验流程与操作步骤：A11 cMb经Cy5.5偶联与放射性标记后，小鼠注射示踪剂，在特定时间点进行微型PET/CT和荧光成像，处死后开展离体生物分布及荧光分析。
5：5偶联与放射性标记后，小鼠注射示踪剂，在特定时间点进行微型PET/CT和荧光成像，处死后开展离体生物分布及荧光分析。 数据分析方法：
5. 数据分析方法：采用AMIDE软件处理PET图像、Living Image分析荧光数据、FlowJo处理流式细胞术数据，GraphPad Prism进行统计分析（含Holm-?ídák校正的t检验）。
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获取完整内容-
microPET scanner
Inveon
Siemens
Used for positron emission tomography imaging of mice to detect radiolabeled tracers.
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IVIS Lumina II
Lumina II
Perkin Elmer
Used for near-infrared fluorescence imaging to detect Cy5.5 signals in tumors and tissues.
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gamma counter
Wizard 3" 1480
Perkin-Elmer
Used to measure radioactivity in samples for biodistribution studies and immunoreactivity assays.
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flow cytometer
BD-LSRFortessa X-20
BD
Used for cell binding assays to determine affinity of A11 cMb to PSCA-positive cells.
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spectrophotometer
NanoDrop 2000
NanoDrop
Used to measure protein and dye concentrations by absorbance at 280 nm and 675 nm.
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size exclusion column
Superdex 200 10/30 GL
GE Healthcare
Used for size exclusion chromatography to purify and characterize conjugated proteins.
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mal-Cy5.5
maleimide-Cy5.5
Amersham, GE Healthcare
Near-infrared fluorophore conjugated to A11 cMb for fluorescence imaging.
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p-SCN-Bn-DFO
B-705
Macrocyclics
Chelator used for conjugating to A11 cMb for 89Zr radiolabeling.
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Iodogen tubes
Pierce
Used for radioiodination of proteins with 124I.
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Micro Bio-Spin Size Exclusion Columns
Bio-Rad
Used to remove excess dyes or chelators after conjugation reactions.
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